24小时热门版块排行榜    

查看: 1264  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

[交流] PCR条带不亮求助已有8人参与

本人分子菜鸟一枚,PCR跑1%的琼脂糖电泳,第四泳道的条带不是很亮,求大神指点下!谢谢。。。
PCR过程:
95℃  5min
94℃  30s
55℃   30s
72℃   2.5min
72℃   7min
30个循环
PCR条带不亮求助
IMG_2510.JPG
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

好好搞学术
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by Sthunder at 2013-07-27 11:22:22
上面那么大的带,应该是模板吧!如果只load了5ul的话应该没多大问题,下次降低一点退火温度试试看,做个TD最好。good  luck

我P的基因就是差不多那样大的!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
14楼2013-07-27 11:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

biomed_fanyi

新虫 (初入文坛)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-25 14:28:09
你是说 PCR 产物量不够?你load了多少样品?

你的PCR产物是为了做什么?如果是分子克隆,产物足够的话(比如说胶上load了5ul 但是你总共有20ul),应该问题不大。需要注意的反而是上面的那个非特异带。你可能要纯化一下你需要的条带

如果真是做克隆,担心量少的话,你就多做几个pcr,合在一起好了。
2楼2013-07-25 11:17:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

好的!谢谢……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
3楼2013-07-25 13:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

你说的非特异性带是最头上那条吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
4楼2013-07-25 13:35:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 杭电、天津科技、青农和宁波工程学院如何选? +11 味道很好啊 2024-06-13 21/1050 2024-06-16 13:57 by wanglongzh
[论文投稿] 二审返修送审10天了,原来一审的3个审稿人只有2个接受了审稿,会邀请新审稿人么? 50+3 huanpo116 2024-06-15 5/250 2024-06-16 10:27 by bobvan
[考博] 2025考博 +5 自强不息a?a 2024-06-15 7/350 2024-06-16 10:07 by wang333666
[考博] 34岁读博士晚吗 +26 emitdne 2024-06-13 26/1300 2024-06-16 07:16 by liyeqik
[论文投稿] 投稿被一个审稿人恶意评审了怎么样? +5 1chen 2024-06-14 7/350 2024-06-15 23:15 by xy66xy
[教师之家] 关于2023的收入 +33 小龙虾2008 2024-06-10 34/1700 2024-06-15 23:01 by zeolitess
[基金申请] 2024国社科通讯评审 +9 qsd10086 2024-06-13 14/700 2024-06-15 15:51 by thesuna
[论文投稿] 投了一篇4区的SCI,审稿人一个拒稿,一个小修,编辑给了大修。 +9 安稳22123 2024-06-13 10/500 2024-06-14 23:45 by jurkat.1640
[食品] 食品博士导师 +6 小李醒yy 2024-06-11 9/450 2024-06-14 23:37 by 小李醒yy
[基金申请] E12面上申请 +4 汉风之遗 2024-06-13 4/200 2024-06-14 15:28 by 天外飞去来
[考博] 申博找导师 +4 疏影横斜水清浅3 2024-06-13 6/300 2024-06-14 14:31 by zxl_1105
[基金申请] 国自然基金公布的时候基金号有吗 +8 潇洒怡惜 2024-06-13 11/550 2024-06-14 11:24 by JRfei
[论文投稿] ACS Nano投稿后分配到副编辑手里12天了,能确定送审了吗? +5 潇洒怡惜 2024-06-12 10/500 2024-06-14 09:56 by 潇洒怡惜
[基金申请] 工材E10口函评结束了吗 10+3 我1的飞翔 2024-06-13 5/250 2024-06-14 06:35 by nono2009
[论文投稿] 投稿后发现其他作者的邮箱填错了该怎么办呀 10+4 在飞的猪 2024-06-13 6/300 2024-06-14 04:45 by 小虫子咔咔
[基金申请] 博士后面上项目状态还是专家评审吗 10+9 Thatcheremu 2024-06-13 55/2750 2024-06-13 21:23 by 乌合麒麟
[有机交流] 原料反应完了,怎么知道是产物还是中间体 +6 小胡在努力 2024-06-11 8/400 2024-06-13 13:33 by 091602
[基金申请] 博后特助这周出结果吗?往年都是啥时候啊? +13 jsqy 2024-06-12 17/850 2024-06-12 19:55 by Lynn212
[论文投稿] water research状态咨询 5+3 Flyyawa 2024-06-10 6/300 2024-06-11 09:45 by bobvan
[教师之家] 公办双非,学生论文升学就业都不行。一本大学的论文升学就业没问题吧? +5 河西夜郎 2024-06-09 5/250 2024-06-10 17:59 by yyallen2003
信息提示
请填处理意见