24小时热门版块排行榜    

查看: 1269  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

[交流] PCR条带不亮求助已有8人参与

本人分子菜鸟一枚,PCR跑1%的琼脂糖电泳,第四泳道的条带不是很亮,求大神指点下!谢谢。。。
PCR过程:
95℃  5min
94℃  30s
55℃   30s
72℃   2.5min
72℃   7min
30个循环
PCR条带不亮求助
IMG_2510.JPG
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

好好搞学术
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by denghengning at 2013-07-26 14:12:32
亲,你的目的条带是那一条呢?你可以尝试增加几个循环,(看你才跑30个循环啊)。如果目的条带还没有非特异性条带亮的话,建议你重新设计引物!

谢谢。。。是第四泳道的最头上那一条带!
好好搞学术
12楼2013-07-27 09:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

biomed_fanyi

新虫 (初入文坛)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-25 14:28:09
你是说 PCR 产物量不够?你load了多少样品?

你的PCR产物是为了做什么?如果是分子克隆,产物足够的话(比如说胶上load了5ul 但是你总共有20ul),应该问题不大。需要注意的反而是上面的那个非特异带。你可能要纯化一下你需要的条带

如果真是做克隆,担心量少的话,你就多做几个pcr,合在一起好了。
2楼2013-07-25 11:17:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

好的!谢谢……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
3楼2013-07-25 13:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijianfu12

银虫 (正式写手)

你说的非特异性带是最头上那条吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
4楼2013-07-25 13:35:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 2025年博士申请,可先做科研助理 +4 limit888 2024-06-18 7/350 2024-06-20 10:23 by 安塔瓦拉多
[基金申请] 工材口青年基金上会可能性 +7 今晚推荐22 2024-06-19 9/450 2024-06-20 09:39 by falldwon
[基金申请] 面青地会评时间??? +6 Axvdvbfs 2024-06-19 7/350 2024-06-20 09:12 by 蜕变123~
[基金申请] 希望今年自己国自然面上项目和老婆青年项目能中! +10 恐龙爸爸 2024-06-14 10/500 2024-06-20 08:42 by jsguo4127
[基金申请] F03青年基金函评结果 +3 暨阳一只柴 2024-06-19 3/150 2024-06-20 06:55 by kobe0107
[考博] 关于读博感觉自己很抓马 +8 小九月 2024-06-19 11/550 2024-06-19 19:22 by 鱼翔浅底1
[论文投稿] 审稿 +5 香瓜木香 2024-06-19 6/300 2024-06-19 17:44 by xli1984
[论文投稿] ACS AMI 返回审稿意见,一个大修,两个据稿,编辑给的修改重投 +5 智商已更新 2024-06-19 5/250 2024-06-19 12:35 by nono2009
[硕博家园] 关于硕博连读的一些疑问? +8 Lwenter 2024-06-14 10/500 2024-06-19 10:00 by qingdao001
[考博] 2025考博 +8 自强不息a?a 2024-06-15 13/650 2024-06-18 18:12 by 投必得科研顾问
[基金申请] F口401需要啥文章水平 +3 lhjr123 2024-06-16 7/350 2024-06-18 16:05 by hon920603
[有机交流] 跑板能跑开,过柱过不纯怎么办 +4 小胡在努力 2024-06-18 6/300 2024-06-18 15:20 by long8811
[高分子] 烧瓶内合成聚酯 +3 大帝国乐 2024-06-17 7/350 2024-06-18 11:10 by 大帝国乐
[硕博家园] 博士毕业高校和就业的相关问题 +7 SCITOPPP 2024-06-14 11/550 2024-06-18 07:51 by yinxing1995
[教师之家] 每次骚扰女学生的都是院系领导,而不是普通教师,小编们要注意措辞正确 +9 zju2000 2024-06-15 11/550 2024-06-16 14:49 by appleapple2
[基金申请] 博后基金,博管会会提前知道消息吗? +4 yuyiang 2024-06-13 4/200 2024-06-16 11:40 by yangyuzhong4
[基金申请] 博士后创新人才支持计划公示 +9 aishida144 2024-06-14 15/750 2024-06-16 09:52 by msjy
[基金申请] 为什么我的博后基金还在流动站审核中?不会是学院给我卡了吧? +14 王凯12 2024-06-13 26/1300 2024-06-15 15:22 by 好人与坏人
[基金申请] E12面上申请 +4 汉风之遗 2024-06-13 4/200 2024-06-14 15:28 by 天外飞去来
[有机交流] ππ堆积会发生在有机溶剂中吗 5+3 zibuyu0420 2024-06-13 4/200 2024-06-14 14:17 by 小肉干
信息提示
请填处理意见