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syjiang

新虫 (初入文坛)

[求助] 哪位教教我怎么反复吹打

用移液器做PCR时,加试剂的时候要反复吹打几次来混匀。还有电泳时要把PCR产物和其他试剂混合也要反复吸排几次。哪位教教我反复吸打的时候怎么操作呢?
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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额,这问题好菜,枪尖浸没在液体里,移液器顶部的按钮按下去再松开反复几次就好了哇。此外,PCR加样时候可以不用混匀的,试剂都加进去以后短暂离心下直接PCR,PCR的时候热循环温度足够将液体混匀的。
2楼2013-07-24 11:23:46
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syjiang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangweida2 at 2013-07-24 11:23:46
额,这问题好菜,枪尖浸没在液体里,移液器顶部的按钮按下去再松开反复几次就好了哇。此外,PCR加样时候可以不用混匀的,试剂都加进去以后短暂离心下直接PCR,PCR的时候热循环温度足够将液体混匀的。

额也知道好菜,刚开始做实验心惊胆战。我想问的是打出液体到第二停点,再往上重新吸取时松至第一停点还是彻底松开?
3楼2013-07-24 11:39:27
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR混合最好不要吹打,有些buffer里有detergent,容易起泡。一般可以轻度votex,稍微离下心。
4楼2013-07-24 13:06:53
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by syjiang at 2013-07-24 11:39:27
额也知道好菜,刚开始做实验心惊胆战。我想问的是打出液体到第二停点,再往上重新吸取时松至第一停点还是彻底松开?...

我个人习惯,吹打混匀的时候打下去是到第一档停,松开的时候差不多是松到原位吧。最后一次打下去是到第二档停。刚开始做实验做错很正常的,不用心惊胆战,多做几次心里有个概念就好。
5楼2013-07-24 14:45:27
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jchzh432

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
就是用枪吹打3-4次
6楼2013-07-24 15:24:56
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shi16

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by syjiang at 2013-07-24 11:39:27
额也知道好菜,刚开始做实验心惊胆战。我想问的是打出液体到第二停点,再往上重新吸取时松至第一停点还是彻底松开?...

到第一个就可以。第二档是用来把枪头里的液体全部吹出去用的。按住第二档时吸的话,吸的量超过刻度了哦
7楼2013-07-24 18:24:16
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