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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 从木兰假丝酵母中获取已知序列的目的基因该怎么做
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~小绿~

铁虫 (小有名气)

[求助] 从木兰假丝酵母中获取已知序列的目的基因该怎么做

有篇硕士论文中是采用提取酵母的总DNA，再进行PCR获取目的基因，但是酵母基因中不是含内含子的吗？是否需要先提总RNA，再RT-PCR呢，求助各位大神啦
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我可以
1楼 2013-07-23 14:32:06
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~小绿~

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bolysu at 2013-07-23 16:02:32
看到你了

？？
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我可以
5楼2013-07-23 16:21:18
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xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
~小绿~(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-24 16:46:12
能检索到目的基因的序列吗，酵母基因有内含子的较少，如果你的运气不坏的话，你的目的基因没有内含子，你就可以用基因组DNA来克隆。如果只有一段内含子，可以通过SOE PCR或者提RNA再克隆。如果多段，那就RNA吧
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越学越无知
2楼2013-07-23 14:40:32
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~小绿~

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xz2001199802 at 2013-07-23 14:40:32
能检索到目的基因的序列吗，酵母基因有内含子的较少，如果你的运气不坏的话，你的目的基因没有内含子，你就可以用基因组DNA来克隆。如果只有一段内含子，可以通过SOE PCR或者提RNA再克隆。如果多段，那就RNA吧

好的，想先提基因组DNA试试看，因为实验室之前没人做过提RNA和RT-PCR
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我可以
3楼2013-07-23 14:45:38
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励积极交流发帖，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-24 16:46:52
提RNA，做RT也不难啊，现在都有kit
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6楼2013-07-23 16:28:12
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