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~小绿~

铁虫 (小有名气)

[求助] 从木兰假丝酵母中获取已知序列的目的基因该怎么做

有篇硕士论文中是采用提取酵母的总DNA,再进行PCR获取目的基因,但是酵母基因中不是含内含子的吗?是否需要先提总RNA,再RT-PCR呢,求助各位大神啦
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我可以
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xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
~小绿~(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩 2013-07-24 16:46:12
能检索到目的基因的序列吗,酵母基因有内含子的较少,如果你的运气不坏的话,你的目的基因没有内含子,你就可以用基因组DNA来克隆。如果只有一段内含子,可以通过SOE PCR或者提RNA再克隆。如果多段,那就RNA吧
越学越无知
2楼2013-07-23 14:40:32
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~小绿~

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xz2001199802 at 2013-07-23 14:40:32
能检索到目的基因的序列吗,酵母基因有内含子的较少,如果你的运气不坏的话,你的目的基因没有内含子,你就可以用基因组DNA来克隆。如果只有一段内含子,可以通过SOE PCR或者提RNA再克隆。如果多段,那就RNA吧

好的,想先提基因组DNA试试看,因为实验室之前没人做过提RNA和RT-PCR
我可以
3楼2013-07-23 14:45:38
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bolysu

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2013-07-23 16:02:32
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~小绿~

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bolysu at 2013-07-23 16:02:32
看到你了

??
我可以
5楼2013-07-23 16:21:18
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励积极交流发帖,分子生物期待你的更多精彩 2013-07-24 16:46:52
提RNA,做RT也不难啊,现在都有kit
6楼2013-07-23 16:28:12
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