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~小绿~

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[求助] 从木兰假丝酵母中获取已知序列的目的基因该怎么做

有篇硕士论文中是采用提取酵母的总DNA，再进行PCR获取目的基因，但是酵母基因中不是含内含子的吗？是否需要先提总RNA，再RT-PCR呢，求助各位大神啦

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我可以

1楼 2013-07-23 14:32:06

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xz2001199802

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★
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~小绿~(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-24 16:46:12

能检索到目的基因的序列吗，酵母基因有内含子的较少，如果你的运气不坏的话，你的目的基因没有内含子，你就可以用基因组DNA来克隆。如果只有一段内含子，可以通过SOE PCR或者提RNA再克隆。如果多段，那就RNA吧

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越学越无知

2楼2013-07-23 14:40:32

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~小绿~

铁虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by xz2001199802 at 2013-07-23 14:40:32
能检索到目的基因的序列吗，酵母基因有内含子的较少，如果你的运气不坏的话，你的目的基因没有内含子，你就可以用基因组DNA来克隆。如果只有一段内含子，可以通过SOE PCR或者提RNA再克隆。如果多段，那就RNA吧

好的，想先提基因组DNA试试看，因为实验室之前没人做过提RNA和RT-PCR

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我可以

3楼2013-07-23 14:45:38

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