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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教师兄师姐，-80℃的大肠杆菌甘油菌如何活化和保存
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wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 请教师兄师姐，-80℃的大肠杆菌甘油菌如何活化和保存

rt，刚过来，老师有批甘油菌，保存在-80下，要接种的话是直接拿出来融化。接种后在放进去吗？要不要什么处理
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1楼 2013-07-21 14:52:02
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wzp9012: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-22 08:31:01
不需要处理. 当然可以不用融化, 刮出来一些就能接种了.
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2楼2013-07-21 15:05:36
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wzp9012

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-07-21 15:05:36
不需要处理. 当然可以不用融化, 刮出来一些就能接种了.

那请问，从-80冰箱拿出来，是不要要在冰浴上缓一下呢，直接室温会不会太差异会不会太大，。刮好后，就再放进去保藏就可以了吗
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3楼2013-07-21 15:48:33
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by wzp9012 at 2013-07-21 15:48:33
那请问，从-80冰箱拿出来，是不要要在冰浴上缓一下呢，直接室温会不会太差异会不会太大，。刮好后，就再放进去保藏就可以了吗...

不用的. 刮出来的直接接种到培养液里就行了.
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4楼2013-07-21 18:28:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wzp9012: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-22 08:31:14
我一般是在冻的状态下刮一点在平板上划线。经活化后再挑单克隆摇菌。一般从-80°C直接活化的菌第一代生长状态不是特别好，最好不要直接提质粒或者做蛋白表达。
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5楼2013-07-21 21:34:38
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wzp9012

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-21 21:34:38
我一般是在冻的状态下刮一点在平板上划线。经活化后再挑单克隆摇菌。一般从-80°C直接活化的菌第一代生长状态不是特别好，最好不要直接提质粒或者做蛋白表达。

恩，之前也看到过说要用第二代或第三代的接摇瓶表达的。那在冻的情况下刮了后，那菌种是不是可以直接放冰箱里，不需要处理了呢
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6楼2013-07-22 08:34:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
wzp9012: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-22 14:31:05
引用回帖:
6楼: Originally posted by wzp9012 at 2013-07-22 08:34:05
恩，之前也看到过说要用第二代或第三代的接摇瓶表达的。那在冻的情况下刮了后，那菌种是不是可以直接放冰箱里，不需要处理了呢...

从-80冻存的管子里刮下来划平板，37°C培养过夜，板长好后放在4°C冷藏。
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7楼2013-07-22 11:49:27
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顺风飞翔123

新虫 (初入文坛)
请求帮助！
我用高保真酶扩的pcr产物4.1Kb，进行双酶切后，总是和载体连接不上，求助！
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8楼2013-08-08 20:28:59
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nanamaka

新虫 (初入文坛)
无需处理，吸一点接种就行
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人生若只如初见
9楼2013-08-08 21:11:38
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