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wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 请教师兄师姐,-80℃的大肠杆菌甘油菌如何活化和保存

rt,刚过来,老师有批甘油菌,保存在-80下,要接种的话是直接拿出来融化。接种后在放进去吗?要不要什么处理
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wzp9012: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-22 08:31:01
不需要处理. 当然可以不用融化, 刮出来一些就能接种了.
2楼2013-07-21 15:05:36
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wzp9012

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-07-21 15:05:36
不需要处理. 当然可以不用融化, 刮出来一些就能接种了.

那请问,从-80冰箱拿出来,是不要要在冰浴上缓一下呢,直接室温会不会太差异会不会太大,。刮好后,就再放进去保藏就可以了吗
3楼2013-07-21 15:48:33
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by wzp9012 at 2013-07-21 15:48:33
那请问,从-80冰箱拿出来,是不要要在冰浴上缓一下呢,直接室温会不会太差异会不会太大,。刮好后,就再放进去保藏就可以了吗...

不用的. 刮出来的直接接种到培养液里就行了.
4楼2013-07-21 18:28:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wzp9012: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-22 08:31:14
我一般是在冻的状态下刮一点在平板上划线。经活化后再挑单克隆摇菌。一般从-80°C直接活化的菌第一代生长状态不是特别好,最好不要直接提质粒或者做蛋白表达。
5楼2013-07-21 21:34:38
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wzp9012

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-21 21:34:38
我一般是在冻的状态下刮一点在平板上划线。经活化后再挑单克隆摇菌。一般从-80°C直接活化的菌第一代生长状态不是特别好,最好不要直接提质粒或者做蛋白表达。

恩,之前也看到过说要用第二代或第三代的接摇瓶表达的。那在冻的情况下刮了后,那菌种是不是可以直接放冰箱里,不需要处理了呢
6楼2013-07-22 08:34:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


wzp9012: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-22 14:31:05
引用回帖:
6楼: Originally posted by wzp9012 at 2013-07-22 08:34:05
恩,之前也看到过说要用第二代或第三代的接摇瓶表达的。那在冻的情况下刮了后,那菌种是不是可以直接放冰箱里,不需要处理了呢...

从-80冻存的管子里刮下来划平板,37°C培养过夜,板长好后放在4°C冷藏。
7楼2013-07-22 11:49:27
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顺风飞翔123

新虫 (初入文坛)

请求帮助!
我用高保真酶扩的pcr产物4.1Kb,进行双酶切后,总是和载体连接不上,求助!
8楼2013-08-08 20:28:59
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nanamaka

新虫 (初入文坛)

无需处理,吸一点接种就行
人生若只如初见
9楼2013-08-08 21:11:38
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