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cloudhere

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot同种蛋白跑出的条带两条在上两条在下 急需各位高手帮忙!!!!help! 已有1人参与

各位高手麻烦帮下忙,小弟最近在做western blot 出现了些诡异现象,希望高手帮忙指点。
小弟最近用western测两种细胞中同一种蛋白在细胞中和细胞培养基中的表达情况,用的是easysee marker(20-90),结果细胞中两条在最上方(在75和90的marker带之间),培养基中的两条在最下方(在20的marker带处),由于本次的蛋白分子量为90,但结果条带的位置都不对,且其他地方没有条带,且从新跑电泳转膜后条带与原来是相同的。
希望高手们帮助解释下可能导致的原因及解决办法,小弟不胜感激!
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香樟树lily

银虫 (初入文坛)

请问问题解决了吗?我也遇到类似问题。做的是组织样,目的蛋白大小95,42,83.但是最后跑出来的位置都在55到70之间,单一条带,很清楚。重复多次,结果都是这样。
2楼2014-04-09 10:27:50
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huiting410

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

一个原因是你的蛋白降解了,另一个原因是marker可能不太准,你可以跑一个标样对照一下
3楼2014-04-09 15:15:56
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