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julietguo

银虫 (正式写手)

[求助] BCG的菌落计数的详细步骤

各位虫友好,谁有BCG的菌落计数的详细步骤啊,能不能发我一份哪!不胜感激呀!
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cathy1s

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
julietguo: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢!请问你们的BCG是用7H11培养然后做CFU吗?要不要称重后研磨,用什么悬浮BCG,三格板每格涂多少? 2013-07-19 13:39:54
julietguo: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢哈O(∩_∩)O 2013-10-31 22:35:44
培养24小时后,取出培养皿,算出同一稀释度三个平皿上的菌落平均数,并按下列公式进行计算:

每毫升中总活菌数=同一稀释度三次重复的菌落平均数×稀释倍数×5

一般选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释度计算每毫升的菌数最为合适。同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊。由10-4、10-5、10-6三个稀释度计算出的每毫升菌液中总活菌数也不能相差悬殊,如相差较大,表示试验不精确。

平板菌落计数法,所选择倒平板的稀释度是很重要的,一般以三个稀释度中的第二稀释度倒平板所出现的平均菌落数在50个左右为最好。
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平板菌蓓计数法的操作除上述的以外,还可用涂布平板的方法进行。二者操作基本相同,所不同的是涂布平板法是先将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化后倒平板,待凝固后编号,并于 37℃温室中烘烤30分钟左右,使其干燥,然后用无菌吸管吸取 0.2ml菌液对号接种于不同稀释度编号的培养皿中的培养基上,再用无菌玻璃刮棒将菌液在平板上涂布均匀,平放于实验台上20—30分钟,使菌液渗透入培养基内,然后再倒置于37℃的温室中培养。
相信自己,要知道你内心深处的某些东西是比任何困难都要强大的。
2楼2013-07-19 10:39:03
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