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zizygo

新虫 (初入文坛)

[交流] 迷迭香组培(愈伤组织-悬浮细胞)过程在线直播

舒舒服服地过完了不进实验室的研一,本人华丽丽地进入了实验室。这也就是“苦逼”地开始啊~
虽说我是个爱动手的娃儿,可是进入实验室之后,不得不说,实验不仅仅需要的是动手哈~
跟大多数人的开始实验一样,首先我查了好多的资料,看了无数文献,最后定下了我的课题,开始着手实验。
我实验初步目的是得到迷迭香的愈伤组织,在通过继代使之疏松,然后作细胞悬浮培养,最后提取产物。目的是明显的,但是过程却是曲折的。
从第一次做实验,到今天已经一个多月了。可是不得不说,实验成果还没一点影子哪!!
首先我采用的是:将带叶嫩枝接种到B5+IAA+NAA+6-BA的培养基,暗培养,中间有不少由于染菌作废,一个月下来只有一瓶在接触界面有愈伤组织迹象。这期间听说暗培养可能推迟了出愈时间,又改接了一批采用光照/黑暗为14小时/10小时,但是20天既没出愈,也没有枯死,但是大部分枝叶还是有发黄发黑的。
后来又查文献,和询问相关的人员,将培养基改成了MS+NAA+6-BA,接种的是切断的叶片,我做了竖直插入,横摆两种接种方法,但是都华丽地失败了,绝大部分,都发黄枯死,没有任何迹象表明将要出愈伤,剩下几瓶虽然没死,但是感觉出愈伤的可能非常微妙。
昨天再查文献,改变了植物生长素、分裂素的量,并且将接种的短叶片划伤,但是自我感觉不好,因为把材料剪切好后,在接种的过程中,叶片就开始发黑了。觉得成功几率很小。
小木虫呢,谁来指点指点哪~
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迷迭香,我爱你爱到骨子里~
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zizygo

新虫 (初入文坛)

经过好几个月的折腾我的愈伤组织培养已经不成问题了,关键是刚进入悬浮培养,我的问题又来啦,请大家帮忙啊~
迷迭香,我爱你爱到骨子里~
2楼2014-01-03 15:38:19
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zizygo

新虫 (初入文坛)

悬浮培养的细胞居然聚成团了,而且将培养基的浑浊成分吸附得干干净净~!
迷迭香组培(愈伤组织-悬浮细胞)过程在线直播
20131231_142800.jpg

迷迭香,我爱你爱到骨子里~
3楼2014-01-03 15:40:07
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