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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jonew

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 求大神支招

刚刚入道,做克隆,内参可以P出来,但是目标产物就是P不出来!而且PCR完了以后什么也没有,(退火温度、引物、模板浓度也调了几次)。请问哪位大神说说看下一步该怎么做?明天试着做温度梯度PCR。
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借口很贱,,,
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mitocam

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jonew: 金币+3 2013-07-18 08:35:57
查一下目标基因序列的GC含量,不要很高。
4楼2013-07-18 02:42:15
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bullfrog325

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jonew: 金币+5 2013-07-18 08:34:42
楼主思路是对的, 多摸索摸索,
另外再检查一次引物序列, 注意有一条引物需要反相互补.
2楼2013-07-18 00:16:31
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gyesang

无虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jonew: 金币+2 2013-07-18 08:35:29
还有你应考虑你基因表达的丰度,寄你提mRNA的组织是否有你基因的表达
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-07-18 00:39:50
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hyphen007

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上意见都应考虑,模板、引物、退火温度等
5楼2013-07-18 13:01:56
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