24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 721  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jonew

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 求大神支招

刚刚入道,做克隆,内参可以P出来,但是目标产物就是P不出来!而且PCR完了以后什么也没有,(退火温度、引物、模板浓度也调了几次)。请问哪位大神说说看下一步该怎么做?明天试着做温度梯度PCR。
回复此楼
借口很贱,,,
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

禁虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jonew: 金币+2 2013-07-18 08:35:29
还有你应考虑你基因表达的丰度,寄你提mRNA的组织是否有你基因的表达
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-07-18 00:39:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

bullfrog325

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jonew: 金币+5 2013-07-18 08:34:42
楼主思路是对的, 多摸索摸索,
另外再检查一次引物序列, 注意有一条引物需要反相互补.
2楼2013-07-18 00:16:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mitocam

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jonew: 金币+3 2013-07-18 08:35:57
查一下目标基因序列的GC含量,不要很高。
4楼2013-07-18 02:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyphen007

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上意见都应考虑,模板、引物、退火温度等
5楼2013-07-18 13:01:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +7 cs0106 2026-04-01 8/400 2026-04-01 18:34 by 记事本2026
[考研] 290求调剂 +4 dfffsar 2026-03-29 4/200 2026-04-01 14:41 by yulian1987
[考研] 291求调剂 +3 迷蒙木木 2026-04-01 4/200 2026-04-01 11:07 by 逆水乘风
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +15 minht 2026-03-29 16/800 2026-04-01 10:13 by li_sujuan99
[考研] 考研材料工程351分调剂 +5 整个好的 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:36 by topgun2009
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 3/150 2026-03-31 20:27 by 求调剂zz
[考研] 一志愿华东理工大学,080500学硕,317分,求调剂 +9 s1145 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:47 by JourneyLucky
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +11 萝卜炖青菜 2026-03-28 12/600 2026-03-31 17:54 by xhai2011
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 085404 22408 315分 +5 zhuangyan123 2026-03-31 6/300 2026-03-31 13:48 by limeifeng
[考研] 262求调剂 +7 ZZ..000 2026-03-30 8/400 2026-03-31 10:05 by cal0306
[考研] 求调剂 +4 研s. 2026-03-25 4/200 2026-03-31 10:05 by fmesaito
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 370求调剂 +3 080700调剂 2026-03-30 3/150 2026-03-31 01:09 by A_Zhe
[考研] 292求调剂 +13 是妍子也是研子 2026-03-30 13/650 2026-03-30 18:01 by 小徐0109
[考研] 085404求调剂,总分309,本科经历较为丰富 +6 来财aa 2026-03-25 6/300 2026-03-30 09:48 by 青海小西牛
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 356求调剂 +3 gysy?s?a 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:33 by 544594351
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
信息提示
请填处理意见