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植语

金虫 (小有名气)

[求助] 提取细菌基因组DNA时总是会有蛋白残留

提取细菌基因组DNA时总是会有蛋白残留,电泳时,用不同浓度的胶跑出来的效果差距也很远,左边是0.6%的胶右边是1.0%的胶,,加样孔下方一点点的亮条带是不是蛋白残留的结果啊?
提取细菌基因组DNA时总是会有蛋白残留
DSC00591.JPG
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longrna

新虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 植语 at 2013-07-18 14:54:05
想知道是不是提细菌基因组DNA一般都会有蛋白或其他杂质残留?...

不是。
伟大航线....
11楼2013-07-19 08:41:54
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huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
植语(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-17 16:37:10
是的。细菌基因组DNA时有蛋白残留时,跑胶有拖带的现象,胶浓度低,孔径大,拖得更明显。点样孔下的残留的就是蛋白。可以用酚氯仿重新抽提,可以去除一此蛋白。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-07-17 16:32:58
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植语

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 16:32:58
是的。细菌基因组DNA时有蛋白残留时,跑胶有拖带的现象,胶浓度低,孔径大,拖得更明显。点样孔下的残留的就是蛋白。可以用酚氯仿重新抽提,可以去除一此蛋白。

之前纯化过,还是会有,后来换了新的酚氯仿,好了一些,,但做PCR还是得不到目标条带,,,不知道多糖残留会不会也是像图中那样,加样孔下面一点点有亮带,,还有,提的DNA用水溶解有时会很粘稠,不知道是残留了什么?  也很想知道我是用CTAB法提的DNA,不知道SDS和CTAB是在哪步被去除的,,是用异丙醇沉淀的时候溶解在了异丙醇里吗?说是CTAB易溶于异丙醇
3楼2013-07-17 22:17:57
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

看看OD260/OD280的比例对不对,就能确定蛋白残留量有多少
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2013-07-18 00:37:38
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