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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by tyslfzc at 2013-07-21 04:53:30
没有阿,我没有做任何检测,直接表达的,就是单纯是不同的colony...

那测序正确了吧。一般做纯化前不应该用小量诱导摸一下条件,再扩大培养收菌吗?
11楼2013-07-21 14:12:29
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

引用回帖:
10楼: Originally posted by tyslfzc at 2013-07-21 04:53:30
没有阿,我没有做任何检测,直接表达的,就是单纯是不同的colony...

一般我们构建克隆的时候测序对了才会转入到表达系统去表达;这时候就是把对了的质粒转入BL21中,之后涂板子挑选单克隆,之后扩大培养揺菌。
这一步我们一般都把摇好的菌保藏一批起来,如果后继实验无误的话就以保藏的菌液作为种子批,每次都取一点出来进行扩大培养。
如果你没这么干,每次挑平板上的进行揺菌,问题也不大,因为板子上克隆基本是都会表达你的蛋白,但是时间久了杂菌长出来了就完了。因此,最好保菌!
好好做事,踏实做人!
12楼2013-07-21 14:36:34
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tyslfzc

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-21 14:12:29
那测序正确了吧。一般做纯化前不应该用小量诱导摸一下条件,再扩大培养收菌吗?...

没有,我已经最后纯化出来了,是很纯的蛋白,谢谢
13楼2013-07-23 04:37:08
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