24小时热门版块排行榜

返回列表

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by tyslfzc at 2013-07-21 04:53:30
没有阿，我没有做任何检测，直接表达的，就是单纯是不同的colony...

那测序正确了吧。一般做纯化前不应该用小量诱导摸一下条件，再扩大培养收菌吗？

赞一下

回复此楼

11楼2013-07-21 14:12:29

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

MolEPI: 2
应助: 16 (小学生)
金币: 4756.6
散金: 486
红花: 3
帖子: 788
在线: 524.2小时
虫号: 805645
注册: 2009-07-08
性别: GG
专业: 食品加工技术

引用回帖:

10楼: Originally posted by tyslfzc at 2013-07-21 04:53:30
没有阿，我没有做任何检测，直接表达的，就是单纯是不同的colony...

一般我们构建克隆的时候测序对了才会转入到表达系统去表达；这时候就是把对了的质粒转入BL21中，之后涂板子挑选单克隆，之后扩大培养揺菌。
这一步我们一般都把摇好的菌保藏一批起来，如果后继实验无误的话就以保藏的菌液作为种子批，每次都取一点出来进行扩大培养。
如果你没这么干，每次挑平板上的进行揺菌，问题也不大，因为板子上克隆基本是都会表达你的蛋白，但是时间久了杂菌长出来了就完了。因此，最好保菌！

赞一下

回复此楼

好好做事，踏实做人！

12楼2013-07-21 14:36:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

tyslfzc

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 289.5
帖子: 19
在线: 4.3小时
虫号: 434761
注册: 2007-08-19
专业: 生物物理化学

引用回帖:

11楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-21 14:12:29
那测序正确了吧。一般做纯化前不应该用小量诱导摸一下条件，再扩大培养收菌吗？...

没有,我已经最后纯化出来了，是很纯的蛋白，谢谢

赞一下

回复此楼

13楼2013-07-23 04:37:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 tyslfzc 的主题更新

返回列表