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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Ecoli 重组蛋白表达
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tyslfzc

银虫 (初入文坛)

[求助] Ecoli 重组蛋白表达

想请教一下，用ecoli系统表达重组蛋白，两次expression的 cell 可以放在一起 进行后续纯化吗？就是lysis, 然后过各种affinity column/size exclusion column... 谢谢！
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1楼 2013-07-16 11:10:10
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tyslfzc

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-19 23:47:30
你做小量表达检测时看到克隆之间有差别？...

没有阿，我没有做任何检测，直接表达的，就是单纯是不同的colony
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10楼2013-07-21 04:53:30
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
tyslfzc(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-16 13:56:53
如果只是为了纯化蛋白，可以合并细胞样品。
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2楼2013-07-16 11:38:26
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没问题啊   蛋白都是一样的
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hold住
3楼2013-07-16 16:04:05
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tyslfzc

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-16 11:38:26
如果只是为了纯化蛋白，可以合并细胞样品。

可是两次cell里面自带的一些酶不会相互影响吗？我指至少在lysate之后？
我这么问是因为表达的时候，都要求pick single colony，因为有这些限制。
所以我才怀疑，后续有没有影响。
谢谢！
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4楼2013-07-17 07:30:08
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