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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于质粒消化为单核苷酸
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采薇

金虫 (小有名气)

[求助] 关于质粒消化为单核苷酸

小白一枚，求助关于质粒如何消化为单核苷酸，我的质粒就是试剂公司那种人工合成的空白质粒，只是用我自己的药物进行干预，而后做一个高效液相的测定。在跑液相前，消化为单核苷酸，虫虫们有什么建议吗？不胜感激啦~
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行到水穷处，坐看云起时
1楼 2013-07-15 18:06:31
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采薇

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-07-16 01:30:54
直接加Dnase?

我看的文献里除了DNase I ，还要加蛇毒磷酸二酯酶还有碱性磷酸酶，分别作用是什么呢？我也不不清楚呢。您遇过这方面的问题吗？
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行到水穷处，坐看云起时
3楼2013-07-16 08:20:10
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采薇

金虫 (小有名气)
这帖子沉的真快，自己挖出来吧。这三种酶的机理算是搞明白了，但是小虫实验用量少且经费有限，试剂公司的包装对于我的实验来说都太大了，不知道有没有可以拼单买的虫虫们呢？谢谢大家！
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行到水穷处，坐看云起时
4楼2013-07-17 08:27:44
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zxy3309

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

DNA 酶I 能水解双链DNA, 产物为5`端带磷酸基团的单核苷酸及寡核苷酸的混合物。蛇毒磷酸二酯酶能从寡核苷酸上继续切下5`端带磷酸基团的单核苷酸。最终5`端带磷酸基团的单核苷酸经碱性磷酸酶作用经酶解消化为游离核苷.
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5楼2013-10-23 15:34:17
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