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采薇

金虫 (小有名气)

[求助] 关于质粒消化为单核苷酸

小白一枚,求助关于质粒如何消化为单核苷酸,我的质粒就是试剂公司那种人工合成的空白质粒,只是用我自己的药物进行干预,而后做一个高效液相的测定。在跑液相前,消化为单核苷酸,虫虫们有什么建议吗?不胜感激啦~
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行到水穷处,坐看云起时
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

直接加Dnase?
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2013-07-16 01:30:54
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采薇

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-07-16 01:30:54
直接加Dnase?

我看的文献里除了DNase I ,还要加蛇毒磷酸二酯酶还有碱性磷酸酶,分别作用是什么呢?我也不不清楚呢。您遇过这方面的问题吗?
行到水穷处,坐看云起时
3楼2013-07-16 08:20:10
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采薇

金虫 (小有名气)

这帖子沉的真快,自己挖出来吧。这三种酶的机理算是搞明白了,但是小虫实验用量少且经费有限,试剂公司的包装对于我的实验来说都太大了,不知道有没有可以拼单买的虫虫们呢?谢谢大家!
行到水穷处,坐看云起时
4楼2013-07-17 08:27:44
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zxy3309

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

DNA 酶I 能水解双链DNA, 产物为5`端带磷酸基团的单核苷酸及寡核苷酸的混合物。蛇毒磷酸二酯酶能从寡核苷酸上继续切下5`端带磷酸基团的单核苷酸。最终5`端带磷酸基团的单核苷酸经碱性磷酸酶作用经酶解消化为游离核苷.
5楼2013-10-23 15:34:17
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