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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 扩增一个基因
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by fanwq258 at 2013-07-17 08:29:09
我就是用的反转录的cDNA扩增的，可是就是扩不出来啊。
表达的组织和时空特异性要怎么弄呢？...

查文献，看别人报道的在什么组织什么时期表达，如果ncbi上传的是est上面会有一些说明的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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21楼2013-07-17 12:19:37
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by yangjianchen at 2013-07-17 12:19:37
查文献，看别人报道的在什么组织什么时期表达，如果ncbi上传的是est上面会有一些说明的
...

我看了 是在玉米胚乳中提取出来的
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
22楼2013-07-17 13:40:27
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by fanwq258 at 2013-07-17 13:40:27
我看了 是在玉米胚乳中提取出来的...

那就考虑用玉米胚乳提取RNA，反转做
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23楼2013-07-18 19:52:13
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by wangweida2 at 2013-07-17 09:33:27
你见过用mRNA作为模板扩增的吗？...

有啊！一步法做定量PCR啊。这里不是说了，用cDNA吗？
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24楼2013-07-18 19:53:11
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wangweida2

新虫 (小有名气)
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 08:04:57
引用回帖:
24楼: Originally posted by yangjianchen at 2013-07-18 19:53:11
有啊！一步法做定量PCR啊。这里不是说了，用cDNA吗？...

一步法是把逆转录和扩增放在一起做了，步骤上有所区别，原理仍然是以cDNA为模板做扩增。目前技术还没有办法mRNA为模板扩增。
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25楼2013-07-19 10:49:54
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by wangweida2 at 2013-07-19 10:49:54
一步法是把逆转录和扩增放在一起做了，步骤上有所区别，原理仍然是以cDNA为模板做扩增。目前技术还没有办法mRNA为模板扩增。...

了解了解。。。
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26楼2013-07-19 22:50:35
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lijia2054224

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
fanwq258: 金币+20 2013-08-22 15:35:32
多做几次就好了吧，山重水复疑无路，柳暗花又一村。
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27楼2013-08-22 15:30:53
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