24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2615  |  回复: 9

幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取出现白色不溶物质,求大神指点

在进行完转化后,用菌液进行PCR检测到明显条带,然后提取质粒时就是出现白色不溶于水的物质,据目测猜测为蛋白质,不管多次提取,用手提还是试剂盒提都会出现这种东西。我用的是5α菌,载体是PMD-19。求大神指点!!!!!!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

哪一步出的白色物质?
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-07-12 22:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-12 22:54:43
哪一步出的白色物质?

就是在用75%乙醇洗时出现的,前几部都还好
3楼2013-07-13 10:50:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

白色物质是含有蛋白的DNA,一般不影响后期的实验。
4楼2013-07-17 13:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maidi12

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

5楼2013-07-17 19:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老伦敦把子肉

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

白色物质应该是蛋白杂质,如果用试剂盒提取肯定最后不会出现,顶多会堵在柱子上,造成质粒浓度低,手提的话可能就会有,用酚氯仿抽提纯化一下
6楼2013-07-17 20:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 老伦敦把子肉 at 2013-07-17 20:57:27
白色物质应该是蛋白杂质,如果用试剂盒提取肯定最后不会出现,顶多会堵在柱子上,造成质粒浓度低,手提的话可能就会有,用酚氯仿抽提纯化一下

都试过了,还是有的,
7楼2013-07-18 09:14:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi1107

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

试剂盒提还有啊?那柱子估计不好吧。另外,找个照片看看,还有步骤发过来看看,出现这种现象,我们的是加溶液3时浑浊,是菌污染了,重新借别人的感受态解决的。不知道你的菌污染没?
8楼2013-07-18 11:30:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-18 21:58:19
加第三步中和液的时候振荡要轻柔,建议缓慢颠倒混匀几次就可以了。如果振荡过于剧烈的话蛋白碎片过多,离心的时候不能完全沉淀蛋白,70%乙醇加进去的时候蛋白碎片不能溶解就析出来了。
9楼2013-07-18 12:57:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by wangqi1107 at 2013-07-18 11:30:14
试剂盒提还有啊?那柱子估计不好吧。另外,找个照片看看,还有步骤发过来看看,出现这种现象,我们的是加溶液3时浑浊,是菌污染了,重新借别人的感受态解决的。不知道你的菌污染没?

可能,我去试试换菌
10楼2013-07-19 10:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 幽魂银龙 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +17 梁富贵险中求 2026-04-04 18/900 2026-04-08 22:53 by may_新宇
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +20 严西西戏 2026-04-06 26/1300 2026-04-08 22:12 by 凯凯要变帅
[考研] 277求调剂 +16 倪建设 2026-04-06 16/800 2026-04-08 21:28 by zhouxiaoyu
[考研] 一志愿厦大生物学332求调剂 +5 池池池池池池 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:23 by zhyzzh
[考研] 085501机械英二77总分294求调剂,接受跨专业学习 +5 守法公民亓纪 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:19 by bljnqdcc
[考研] 求调剂 +6 chenxrlkx 2026-04-05 8/400 2026-04-08 16:03 by screening
[考研] 326分,一志愿沪9,求生物学调剂 +4 刘墨墨 2026-04-05 4/200 2026-04-08 06:22 by lijunpoly
[考研] 一志愿211电子信息347求调剂 +3 554916 2026-04-03 3/150 2026-04-07 23:22 by 如若时光倒流
[考研] 305分求调剂 +3 哈_哈_哈_哈_哈 2026-04-04 5/250 2026-04-07 14:49 by 哈_哈_哈_哈_哈
[论文投稿] Decision: Revise for Editor还会送审吗 100+3 CccccccccFD 2026-04-04 5/250 2026-04-07 10:58 by 北京莱茵润色
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 材料工程310专硕调剂 +14 捞捞我…. 2026-04-04 15/750 2026-04-06 14:18 by lqwchd
[考研] 0703化学 +9 goldtt 2026-04-02 11/550 2026-04-06 10:35 by 无际的草原
[考研] 282电子信息0854专硕调剂 +4 202451007219 2026-04-02 6/300 2026-04-04 21:55 by laoshidan
[考研] 22408求调剂 354分 可跨专业 +3 hannnnnnn 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:35 by 土木硕士招生
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 313求调剂 +3 ~微微凉~ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 求调剂22408 288分 +5 new382 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:13 by 醉在风里
[考研] 考研调剂 +3 李木子0120 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:45 by dongzh2009
[考研] 一志愿北京科技材料科学与工程288分,求调剂 +14 是辰啊 2026-04-02 14/700 2026-04-02 21:10 by dongzh2009
信息提示
请填处理意见