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十三-小样

铜虫 (小有名气)

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[求助] 有人做过AB-APS染色吗？我染不出来不知道是什么原因，大家帮帮忙！

我的具体操作如下，希望大家能帮帮我
一、步骤：
1.       石蜡脱蜡至水，蒸馏水洗
2.       1%阿里新兰醋酸水溶液10-15分钟
3.       蒸馏水洗30秒
4.       高碘酸溶液6分钟
5.       蒸馏水洗2次，每次30秒
6.       Schiff试剂6分钟
7.       0.5%偏重亚硫酸钠洗2次，每次1-2分钟
8.       流水冲洗5-10分钟
9.       蒸馏水洗2分钟
10.       Harris苏木精染色5分钟
11.       自来水冲洗返蓝
12.       脱水透明封片

二、步骤改进：
1.       石蜡切片脱蜡至水，蒸馏水洗
2.       3%醋酸2分钟
3.       Ph2.5AB染色30-60分钟（60度和常温都做过）（3%醋酸冲洗）
4.       蒸馏水洗2分钟
5.       3%醋酸洗2分钟
6.       蒸馏水洗2分钟
7.       高碘酸7分钟
8.       流水冲洗5分钟
9.       蒸馏水洗2分钟
10.       Schiff试剂5分钟
11.       0.5%偏重亚硫酸钠洗3次，每次3分钟
12.       流水稍微冲洗（流水冲洗超过3分钟，片子变成红色，完全失去蓝色）
13.       蒸馏水洗
14.       Harris染色5分钟，返蓝
15.       脱水透明

每次都是阿里新兰染不出来，步骤一是刚开始有阿里新兰的染色效果，等到染schiff时，蓝色消失，后改进后，在染harris时蓝色消失，曾经把步骤二里的步骤12去掉，效果一样，最终没有蓝色，只有红色，把所有流水冲洗的去掉（流水偏碱性），效果一样，没有蓝色
其他染色正常。

曾经单独染过阿里新兰，染10张只有1张在准确位置染色，其它都没有在准确位置表达，在该染上色的地方没有染上，猜测是可能阿里新兰的配法有问题或者染色方法有问题，

阿里新兰1g，蒸馏水97ml，冰醋酸3ml，ph2.5和1，但是没染出来，请问是步骤有问题还是试剂配的有问题？

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