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guyanling

铁虫 (初入文坛)

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虫号: 2009773
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专业: 环境微生物学

[求助] 关于提取真菌细胞内酶的问题

我做的是黑曲霉还原六价铬的细胞与酶的性质研究，其中，有一项实验内容是，将菌体过夜培养后，分别用上清液，静息细胞，通透细胞和细胞内提取物来处理六价铬。这部分的实验内容是参考文献上的做的，但是有几个问题一直想不明白，求各位虫友指点迷津：
1，为什么要过夜培养，把菌悬液加入液体培养基后过夜培养出的菌体特别少，处理完之后就只剩下一点点了，再去还原六价铬，感觉东西太少，重金属直接就使酶失活了，会不会影响实验数据；
2，通透细胞的制备，文献上面方法不一，而且很多只说是用吐温-80和甲苯处理，一般不会提到用量的问题，不知道细胞和加入试剂的比例如何控制；
3，提取细胞内还原酶的时候，用超声波细胞破碎仪，功率，时间应该如何控制。
因为这个实验已经反复做过好几次了，实验结果都不太理想，还请各位了解这方面的虫友多多指教

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