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[求助]
求助：提取的总基因组，跑胶条带漂移，每次跑胶条带都不一样！！！
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紧急求助 实验需要提取巨噬细胞的基因组，然后用内切酶进行酶切。 结果发现每次跑胶，同样的基因组样品跑的条带大小总是不一样，没有重复性，有时跑到10000多bp，有时又跑到了几百bp。 实验过程为 1.先用1%福尔马林对巨噬细胞进行胶连； 2.用2M的甘氨酸中和福尔马林； 3.用裂解液（500 μl 10 mM Tris-HCl pH 8.0, 10 mM NaCl, 0.2% Igepal CA-630 and 50 μl protease inhibitors）对细胞进行裂解，释放细胞核； 4.加入SDS继续裂解细胞； 5.加入Triton X-100，中和SDS； 6.取样跑琼脂糖电泳进行检测。 电泳出现了很奇怪的现象，提取的基因组在不同时间的电泳条带不一样，稀释前和稀释后的条带也不一样，结果如下：  2，3泳道是刚提取的基因组跑的琼脂糖胶，条带在15000bp左右，而1，4泳道是将提取的基因组放置一段时间（6个小时左右）后跑的琼脂糖胶，条带减小到了250-1000bp之间.  把基因组酶切前的样品：切前1 和 切前2 稀释10倍后，条带大小由7500bp左右减小到了1000bp左右（条带：切前1×10和切前2×10），而且酶切前和酶切后的条带区别不大（见：切前1和切后1；切前2和切后2）。 很奇怪的现象，大家在实验中遇到过这样的问题吗？实验卡在这里，大家帮我分析下，谢谢！ |
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