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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
10楼: Originally posted by zzjj_207 at 2013-07-11 18:50:43
好的,我下次试试这样做
还有那我的胶孔附近的带是什么呢?不是DNA,因为我拍照后发现有带,我又放回去跑了10来分钟,还是没动,所以应该不是DNA,不知道是什么杂质?能不能去除?...

这个就不知道了。
11楼2013-07-11 19:03:16
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
zzjj_207: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-15 09:41:57
引用回帖:
10楼: Originally posted by zzjj_207 at 2013-07-11 18:50:43
好的,我下次试试这样做
还有那我的胶孔附近的带是什么呢?不是DNA,因为我拍照后发现有带,我又放回去跑了10来分钟,还是没动,所以应该不是DNA,不知道是什么杂质?能不能去除?...

点样孔处一般是核酸蛋白复合体,分子量很高,电泳一般跑不下来。一般提DNA或者RNA都会有一些这样的产物。主要是蛋白核酸的解离不完全。
12楼2013-07-11 23:35:50
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zzjj_207: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-07-15 09:41:26
提示几点:
1.RNA通常用分光光度计定量,测量在260 nm处的吸收值(A260)。通常分光光度计A260的读数要介于0.15-1.0之间才是可靠的,因此RNA提取结束后,要根据大概产量稀释(推荐用10 mM Tris.HCl, pH 7.0稀释)到适当浓度范围,再用分光光度计测量。A260为1相当于RNA的浓度为40 µg/ml。
2.为了检测RNA的纯度,可以测量A260与A280的比值,通常纯RNA的A260/A280为1.9-2.1。
3.提取RNA时的用的所有玻璃制品都应该在240℃烘烤3-4小时。提取RNA时的用的所有旧塑料制品都必须用0.5M的NaOH处理10分钟,并用DEPC-H2O彻底冲洗后灭菌,也可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。无法用DEPC处理的用具可以用氯仿擦拭若干次,这样通常可以消除RNA酶的活性。
4.RNA样品一旦从生物体中分离后,细胞内的RNA就变得非常不稳定,容易降解。取样后最好用液氮速冻,再放到超低温冰箱中保存。
Good Luck!
13楼2013-07-11 23:42:33
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
zzjj_207: 金币+2 2013-07-15 09:41:39
还有那我的胶孔附近的带是什么呢?不是DNA,因为我拍照后发现有带,我又放回去跑了10来分钟,还是没动,所以应该不是DNA,不知道是什么杂质?

想知道的话,可以质谱测一下,对比空白的凝胶,走完电泳后,可以将样品连同邻近的凝胶一起挖下来走质谱。
14楼2013-07-11 23:45:41
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sls19881024

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by zzjj_207 at 2013-07-11 18:50:43
好的,我下次试试这样做
还有那我的胶孔附近的带是什么呢?不是DNA,因为我拍照后发现有带,我又放回去跑了10来分钟,还是没动,所以应该不是DNA,不知道是什么杂质?能不能去除?...

亲,我想问一下Bioline的产品好用吗?最近也有人向我们推荐Bioline的产品,价格挺贵的,不知道用后的效果怎么样?
小松
15楼2015-11-16 19:17:27
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zzjj_207

金虫 (小有名气)

我觉得还不错,挺好用的,我提RNA一直用的这个

发自小木虫IOS客户端
16楼2015-11-17 07:08:21
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