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求助啊，谁知道pGEM-T载体连接的buffer中是不是有把载体切开的内切酶啊
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| 哪位大侠知道，pGEM-T载体连接的buffer中是不是有把载体切开的内切酶啊，只是T4连接酶能把载体和目的片段连接起来吗？这个内切酶又是什么呢？ |
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anlewo7777
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| 没有，只是在制作载体的时候，用某个内切酶把一个位点切开，3‘端都是T,而我们PCR的产物末端多有一个A，这样经过T4连接酶就形成了dA:dT配对连接，形成有两个缺刻的环状DNA，转入细胞内后会被细胞内的连接酶补上缺口，形成完整的双链DNA，然后在胞内复制。如果我们的质粒的多克隆位点上有限制性内切酶位点，切割后也可以在3’端有T的话，也可以当T载体用。 |
2楼2013-07-10 13:13:16
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anlewo7777
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cicelyzh
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