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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » WB结果杂不出目的条带，只有特别亮的非特异性条带，求高手解释原因
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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浮帅古: 金币+30, ★★★很有帮助, 谢谢，我今天再试最后一次 2013-07-11 16:03:03
引用回帖:
10楼: Originally posted by 浮帅古 at 2013-07-09 17:39:43
感谢cicelyzh老师的建议，阳性对照我每次上10微克然后加loading buffer补齐，样品我50到120都试过，唯一跑出来那次是上了50微克。

这次我分别用了两家公司的GFP抗体，结果都和以前一样，都是只有非特异性条带， ...

不知道你提取样品的方法是怎样的，一般如果在变性条件下提取，无需蛋白酶抑制剂。如果在native条件下，如果操作时间很长，建议使用蛋白酶抑制剂。如果不使用的话尽量在冰上操作。
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11楼2013-07-10 00:46:58
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