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冯小莉

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：DGGE样品保存问题啰（急）

想问下要做DGGE的水溶液样品怎么保存呢，甘油还是直接-80？？？保存时间多长呢？？还有就是用这种提DNA需要先将细胞离心下来再提不？我担心直接提会不会量不够第一次做，问题有点多。。求各位大侠们回答下喽
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1楼 2013-07-06 21:19:23
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elbo

金虫 (小有名气)
★
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流，分子生物期待你更多精彩 2013-07-07 21:32:52
水溶液样品 什么意思？ DGGE不都是跑PCR产物吗？
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2楼2013-07-07 09:29:32
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冯小莉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by elbo at 2013-07-07 09:29:32
水溶液样品 什么意思？ DGGE不都是跑PCR产物吗？

是啊，但是需要菌来提DNA啊，就是想问下这个菌要怎么保存呢？？
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3楼2013-07-07 20:47:32
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672234993

金虫 (小有名气)
你说的是从水里面提DNA吧，有专门的试剂盒，好像都免不了过滤的步骤
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我会回火星去的，别催我。。。。。。
4楼2013-07-07 23:46:32
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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-07-09 09:31:28
一般我们都是-80保存的，
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5楼2013-07-08 12:11:08
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冯小莉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 堍仔 at 2013-07-08 12:11:08
一般我们都是-80保存的，

就直接将水样放-80？？？不需要甘油么？？
还有，如果怕菌浓度不够的话要怎么处理呢，好像听说要先浓缩，那又怎么个浓缩法呢？？？望解答呀，谢谢大神
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6楼2013-07-08 22:06:53
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冯小莉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 672234993 at 2013-07-07 23:46:32
你说的是从水里面提DNA吧，有专门的试剂盒，好像都免不了过滤的步骤

嗯，我是做土壤混菌的污染物降解，但是没有土。。。所以称为水溶液样品。因为做时间点嘛，所以想把前面时间点的菌保存起来，在后面一起做，以便比较 。但是就是不清楚这混菌的保存法。
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7楼2013-07-08 22:10:25
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672234993

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-07-09 09:31:44
引用回帖:
7楼: Originally posted by 冯小莉 at 2013-07-08 22:10:25
嗯，我是做土壤混菌的污染物降解，但是没有土。。。所以称为水溶液样品。因为做时间点嘛，所以想把前面时间点的菌保存起来，在后面一起做，以便比较 。但是就是不清楚这混菌的保存法。...

一般做分子方面的放-70或者-80保存，甘油什么的我觉得没关系，因为后面是提的DNA，菌死就死了吧，反正提DNA的时候还是得裂解菌体的。
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我会回火星去的，别催我。。。。。。
8楼2013-07-08 22:23:34
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冯小莉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 672234993 at 2013-07-08 22:23:34
一般做分子方面的放-70或者-80保存，甘油什么的我觉得没关系，因为后面是提的DNA，菌死就死了吧，反正提DNA的时候还是得裂解菌体的。...

哦哦，这样子
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9楼2013-07-11 10:15:37
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hnhn66

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不知道你说的 是水样不？  水样没有提取DNA之前保存在-80超低温冰箱里。提出DNA 以后-20保存就可以了
水体中DNA提取可以先用滤膜抽滤，然后用试剂盒提取，当时用的是OMEGA的。
一般量不会不够的。每次都是很亮的条带。
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10楼2013-07-31 08:52:46
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