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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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冯小莉

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:DGGE样品保存问题啰(急)

想问下要做DGGE的水溶液样品怎么保存呢,甘油还是直接-80???保存时间多长呢??还有就是用这种提DNA需要先将细胞离心下来再提不?我担心直接提会不会量不够第一次做,问题有点多。。求各位大侠们回答下喽
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elbo

金虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流,分子生物期待你更多精彩 2013-07-07 21:32:52
水溶液样品 什么意思? DGGE不都是跑PCR产物吗?
2楼2013-07-07 09:29:32
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冯小莉

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by elbo at 2013-07-07 09:29:32
水溶液样品 什么意思? DGGE不都是跑PCR产物吗?

是啊,但是需要菌来提DNA啊,就是想问下这个菌要怎么保存呢??
3楼2013-07-07 20:47:32
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672234993

金虫 (小有名气)

你说的是从水里面提DNA吧,有专门的试剂盒,好像都免不了过滤的步骤
我会回火星去的,别催我。。。。。。
4楼2013-07-07 23:46:32
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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2013-07-09 09:31:28
一般我们都是-80保存的,
5楼2013-07-08 12:11:08
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冯小莉

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 堍仔 at 2013-07-08 12:11:08
一般我们都是-80保存的,

就直接将水样放-80???不需要甘油么??
还有,如果怕菌浓度不够的话要怎么处理呢,好像听说要先浓缩,那又怎么个浓缩法呢???望解答呀,谢谢大神
6楼2013-07-08 22:06:53
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冯小莉

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 672234993 at 2013-07-07 23:46:32
你说的是从水里面提DNA吧,有专门的试剂盒,好像都免不了过滤的步骤

嗯,我是做土壤混菌的污染物降解,但是没有土。。。所以称为水溶液样品。因为做时间点嘛,所以想把前面时间点的菌保存起来,在后面一起做,以便比较 。但是就是不清楚这混菌的保存法。
7楼2013-07-08 22:10:25
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672234993

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-09 09:31:44
引用回帖:
7楼: Originally posted by 冯小莉 at 2013-07-08 22:10:25
嗯,我是做土壤混菌的污染物降解,但是没有土。。。所以称为水溶液样品。因为做时间点嘛,所以想把前面时间点的菌保存起来,在后面一起做,以便比较 。但是就是不清楚这混菌的保存法。...

一般做分子方面的放-70或者-80保存,甘油什么的我觉得没关系,因为后面是提的DNA,菌死就死了吧,反正提DNA的时候还是得裂解菌体的。
我会回火星去的,别催我。。。。。。
8楼2013-07-08 22:23:34
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冯小莉

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 672234993 at 2013-07-08 22:23:34
一般做分子方面的放-70或者-80保存,甘油什么的我觉得没关系,因为后面是提的DNA,菌死就死了吧,反正提DNA的时候还是得裂解菌体的。...

哦哦,这样子
9楼2013-07-11 10:15:37
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hnhn66

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不知道你说的 是水样不?  水样没有提取DNA之前保存在-80超低温冰箱里。提出DNA 以后-20保存就可以了
水体中DNA提取可以先用滤膜抽滤,然后用试剂盒提取,当时用的是OMEGA的。
一般量不会不够的。每次都是很亮的条带。
10楼2013-07-31 08:52:46
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