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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 核酸电泳图求分析
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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 核酸电泳图求分析

各位虫友，我从昨天开始做PCR及核酸电泳，电泳图出现问题，缓冲液是TAE，新稀释的，marker为4500bp，marker拖尾严重，溶胶时间1min左右，待沸腾后每隔约5秒拿出来摇匀一下，染料用的gelred，电压90v，电泳50min，请各位帮忙分析原因。
核酸电泳图求分析
1.jpg
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1楼 2013-07-04 16:43:23
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windycui

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
24楼: Originally posted by 672234993 at 2013-07-08 22:27:29
你好，能不能说说你具体的电泳的步骤呢？就是你怎么做的胶。。。是把GelRed加到融化的琼脂糖里面的吗？上样量多少？电泳的时候电压多少，跑多长时间？...

嗯，好的，我是先熔胶，1.2%的琼脂糖凝胶，熔好后晾一会加gelred，上样10微升，加6倍loading2微升，电泳电压90v，40-50min，缓冲液是TAE
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25楼2013-07-09 10:52:18
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-04 22:36:15
windycui: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢提供帮助 2013-07-06 09:00:48
1，胶的浓度，，2，marker有无污染，，有些dna酶污染。可以影响条带
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2楼2013-07-04 21:47:21
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-07-05 15:03:22
windycui: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢提供意见 2013-07-06 09:01:07
胶是否熔好不能以时间判断，应该通过目测完全没有颗粒物才行。很多时候沸腾后还是有不熔的颗粒，不是趁热摇就可以完全熔掉的。
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3楼2013-07-05 00:51:56
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windycui

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:47:21
1，胶的浓度，，2，marker有无污染，，有些dna酶污染。可以影响条带

marker是新的，应该没有污染吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-07-05 07:53:27
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