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sxl8495

银虫 (小有名气)

[求助] 关于多肽合成中二硫键的问题,着急! 已有1人参与

各位大侠:本人在做二硫键的多肽,总共9个氨基酸,在HPLC分析时,单一的分析环化前后样品,略微能分得开(能考到两个峰靠的很近,但不重合),当把两个样品混合后无法分开,就一个峰。后来采用Ellman检测试剂检测巯基含量,经过计算后成二硫键前为0.0000473,环化后测得0.00000217.能不说明环化完成?我找的资料只说怎么测,怎么算,并没有说达到什么标准为环化完成。请高手帮忙,谢谢啦!
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p53jun

铁虫 (小有名气)

顺便问一下:60个氨基酸,8个半胱氨酸,的天然多肽(近似胰岛素)是不是困难到无法合成?
4楼2013-07-30 10:22:58
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sxl8495: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-05 11:57:26
这种分子内二硫键环化是这样的情况,环化前后目标产物之间的保留时间间隔很小,建议摸索一下,如果你走的是宽梯度,如果样品浓度有偏高,的确可能只有一根峰。最好能在较窄的梯度下或者等度条件下走一针混合样,应该可以分开的。
2楼2013-07-04 17:46:38
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sxl8495

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shale1983 at 2013-07-04 17:46:38
这种分子内二硫键环化是这样的情况,环化前后目标产物之间的保留时间间隔很小,建议摸索一下,如果你走的是宽梯度,如果样品浓度有偏高,的确可能只有一根峰。最好能在较窄的梯度下或者等度条件下走一针混合样,应该 ...

请问你有没有你Ellman检测试剂检测巯基含量的文献,提供我两篇,我下不到
3楼2013-07-09 17:01:50
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sxl8495

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by p53jun at 2013-07-30 10:22:58
顺便问一下:60个氨基酸,8个半胱氨酸,的天然多肽(近似胰岛素)是不是困难到无法合成?

应该没有吧,多少能出点东西
5楼2013-07-31 11:24:54
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