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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 抗氧化活性成分的分离纯化
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Eva_yanglh

金虫 (小有名气)

[交流] 抗氧化活性成分的分离纯化 已有5人参与

目前在做植化，粗提物萃取后欲把水部进一步分析，由于含水量大不能上硅胶于是我用了大孔树脂，然后得到50%乙醇洗脱部位含有较多我想要的物质，经过UV确定波长后再用HPLC扫描发现只有四个峰，物质可不可以判断相对较纯了呢？可是截取某峰进行打谱还是不OK··不知道下一步该怎么再纯化了。50%乙醇部能上硅胶不？可是看资料硅胶还是属于粗分的分离手段呢···用凝胶么？希望有经验的大侠们能指导交流下.
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做这个分离纯化，想死的心都有了···
1楼 2013-07-03 11:59:42
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Decis

银虫 (小有名气)
★ ★
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xiaoxiao270: 金币+1 2013-07-06 19:09:32
用分析液相来制备，太难搞了。
50%乙醇洗脱的极性比较大，可考虑先用硅胶粗分，然后再反相柱层析。
样品旋不干，可能你的真空泵不行。可以倒在一个表面皿里，放在水浴锅上用风扇吹，现在气温高，干得很快的，这个，一般人我不告诉他。
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小木虫，威力无穷
8楼2013-07-04 16:45:33
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wangkaibo123

荣誉版主 (职业作家)

kerry

优秀版主
★ ★
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xiaoxiao270: 金币+1 2013-07-06 19:09:18
先把样品旋干，之后就可以上硅胶柱了，液相制备最好了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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Domyallbesttohaveahappylife.
2楼2013-07-03 13:32:15
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分离高手

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
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xiaoxiao270: 金币+2 2013-07-06 19:09:22
你这个好弄
方案一：直接把接出来的50%乙醇收集液，加上一倍的水稀释到25%直接上样，上反向层析树脂SKP-10-4300,然后25%乙醇   35%乙醇   45%乙醇  55%乙醇梯度洗脱 ，分段收集你要的每一个物质就行了。然后浓缩旋干掉就OK。
方法二：自己装个ODS柱，粒径最好小点的，40um左右的，浓缩干了，少量溶液上样，梯度洗脱收集。
方案三：有制备液相的话，直接上制备液相。
至于硅胶  凝胶 就基本拉到了。极性太大，又是同一部位
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3楼2013-07-04 12:50:59
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Eva_yanglh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangkaibo123 at 2013-07-03 13:32:15
先把样品旋干，之后就可以上硅胶柱了，液相制备最好了

旋干之后用什么溶剂溶解呢？我们这台旋转蒸发仪老旋不干，好苦恼···
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做这个分离纯化，想死的心都有了···
4楼2013-07-04 15:01:53
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