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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 用1KD大小的蛋白做wetern blot 需要多大孔径的硝酸纤维素膜?

我的蛋白大小都在0.5~2KD之间,做wentern 的话要用多大孔径的硝酸纤维素膜?
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linsui1989

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-03 08:55:13
0.45μm孔径的硝酸纤维素膜是较大分子量样品和常规核酸研究的理想选择。
0.1μm孔径的则用于分子量低于7kD的小分子蛋白转移。

0.5KD蛋白太小,会不会从膜上穿过去?7KD一下所有蛋白用0.1μm硝酸纤维素膜都可以吗?
3楼2013-07-03 10:55:26
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bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
linsui1989(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-03 10:53:52
linsui1989: 金币+4, ★★★★★最佳答案, 谢谢! 2013-07-03 20:44:05
0.45μm孔径的硝酸纤维素膜是较大分子量样品和常规核酸研究的理想选择。
0.1μm孔径的则用于分子量低于7kD的小分子蛋白转移。
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-07-03 08:55:13
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bleach060452

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by linsui1989 at 2013-07-03 10:55:26
0.5KD蛋白太小,会不会从膜上穿过去?7KD一下所有蛋白用0.1μm硝酸纤维素膜都可以吗?...

一般NC膜都只有两个孔径:0.45 和 0.1-0.22的,如果不放心,你可以直接联系各公司的技术支持咨询~~
岂能尽如人意,但求无愧我心
4楼2013-07-03 11:15:47
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棉花糖520

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
NC膜
0.45微米---适用一般蛋白
0.22微米--- 分子量<20kd的蛋白质
0.1微米--- 分子量<7kd 的蛋白质,不过生物公司一般在售的0.22和0.45um的较多,你的蛋白用0.22um的应该可以。
5楼2013-07-03 15:26:50
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