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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用1KD大小的蛋白做wetern blot 需要多大孔径的硝酸纤维素膜？
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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 用1KD大小的蛋白做wetern blot 需要多大孔径的硝酸纤维素膜？

我的蛋白大小都在0.5~2KD之间，做wentern 的话要用多大孔径的硝酸纤维素膜？
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1楼 2013-07-02 17:54:19
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bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
linsui1989(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-03 10:53:52
linsui1989: 金币+4, ★★★★★最佳答案, 谢谢！ 2013-07-03 20:44:05
0.45μm孔径的硝酸纤维素膜是较大分子量样品和常规核酸研究的理想选择。
0.1μm孔径的则用于分子量低于7kD的小分子蛋白转移。
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岂能尽如人意，但求无愧我心
2楼2013-07-03 08:55:13
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linsui1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-07-03 08:55:13
0.45μm孔径的硝酸纤维素膜是较大分子量样品和常规核酸研究的理想选择。
0.1μm孔径的则用于分子量低于7kD的小分子蛋白转移。

0.5KD蛋白太小，会不会从膜上穿过去？7KD一下所有蛋白用0.1μm硝酸纤维素膜都可以吗？
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3楼2013-07-03 10:55:26
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bleach060452

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by linsui1989 at 2013-07-03 10:55:26
0.5KD蛋白太小，会不会从膜上穿过去？7KD一下所有蛋白用0.1μm硝酸纤维素膜都可以吗？...

一般NC膜都只有两个孔径：0.45 和 0.1-0.22的，如果不放心，你可以直接联系各公司的技术支持咨询~~
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岂能尽如人意，但求无愧我心
4楼2013-07-03 11:15:47
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棉花糖520

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
NC膜
0.45微米---适用一般蛋白
0.22微米--- 分子量<20kd的蛋白质
0.1微米--- 分子量<7kd 的蛋白质，不过生物公司一般在售的0.22和0.45um的较多，你的蛋白用0.22um的应该可以。
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5楼2013-07-03 15:26:50
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