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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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m_marion

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
liyongliangx: 金币+2, ★★★很有帮助, 让我知道了以前不知道的一些技巧 2013-07-01 18:16:19
引用回帖:
15楼: Originally posted by liyongliangx at 2013-07-01 13:43:14
不是说时间久了 为非特异性扩增吗?...

不同的酶不一样,应该严格按照说明书的指导做,不要随便改延伸时间,包括退火时间,举例来说:Takara PrimerSTAR的退火时间是5~15s,要是用TaqE常用的30s,经常会出现严重的弥散条带
21楼2013-07-01 17:03:24
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by zou43118217 at 2013-07-01 16:57:52
特异性扩增的最主要原因还是引物的特异性不够,就是太短,使得TM值越高,特异性越高,换引物吧,从来没用过TM值这么低的引物,我一般设TM为68℃的引物,而后根据酶选择不同选取适合合适的退火温度,像UtraPF一般就 ...

我也没有用过 这样的引物 ,当初考虑这是别人已经发表的paper里的,就没有再多想,就直接用了
22楼2013-07-01 18:17:31
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