应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 5000Da蛋白 Sephadex G-50分离的情况
31/1返回列表
查看: 621  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 5000Da蛋白 Sephadex G-50分离的情况

请问各位有没有人用Sephadex G-50来分离小分子肽的，本人分离的是5000Da的蛋白，柱子是1cmX40cm的。根据G-50的分离范围为1500-30KD，按照道理的话，5000Da的蛋白应该是完全渗透的。洗脱一个柱体积（40ml），收集的每管蛋白跑胶后，没有发现目的蛋白。这是什么原因？洗脱体积不够吗？蛋白浓度较低原因？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2013-06-29 16:08:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wander8899

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
czcpudai(zhychen2008代发): 金币+2, 多谢回帖交流 2013-07-04 22:43:57
5Kda可以进入G-50的孔隙中，一个柱体积肯定不能洗脱的，最先出来的是大于30Kda的蛋白质。而且你的柱子太短，至少要90cm，才能有分离效果。如果觉得是浓度太低为何不测一下OD280，可知蛋白浓度。SDS-page的检测范围是大于2微克的蛋白量。
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-04 16:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wander8899 at 2013-07-04 16:39:52
5Kda可以进入G-50的孔隙中，一个柱体积肯定不能洗脱的，最先出来的是大于30Kda的蛋白质。而且你的柱子太短，至少要90cm，才能有分离效果。如果觉得是浓度太低为何不测一下OD280，可知蛋白浓度。SDS-page的检测范围是 ...

非常感谢啊~~~ 我觉得一个柱体积也是太少了，所以打算洗个5，6个柱体积再看看。我的蛋白跑tricine-sds-page,可能是我配的胶问题，在5000kd看不到。打算重新做一下~
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-05 09:24:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856求调剂 +5 zhn03 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:58 by peike
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 11/550 2026-03-25 10:23 by userper
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭