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百变小妮

金虫 (小有名气)

[求助] 淋巴细胞培养基的配方

各位养过淋巴细胞的前辈,请教一下培养基里添加的促分裂因子是哪种啊?添加多大浓度的?
我要把淋巴结取下,把里面的细胞用胰酶分散后放在一起培养。但是淋巴细胞不能分裂,我不知道该添加几种有丝分裂源(或其他)。也不知道剂量是多大。查了许多资料,只看到大家用的是1640培养基,且单独培养一种细胞的比较多,也几乎没有详细说明具体添加的促生长因子剂量。而我这种大杂烩似的培养更没见资料。
实验目的不详,老板不在,就说要我先这样培养着,等他回来再说要干啥。愁死我了~~
求有经验的前辈指点!!非常感谢!对于诚恳有用的指导,我会回赠金币的。
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蓝o海

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
百变小妮: 金币+5, 有帮助 2013-06-28 10:25:22
你试试,1640培养基加上介素-2    1000单位每毫升,CD3   50ng/ml。养养看,不行就CD3加倍。

还有一个配方:IL-2、IL-1a、r-干扰素各1000u/ml     CD3 50ng/ml

希望对你有帮助。
2楼2013-06-28 09:02:24
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百变小妮

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝o海 at 2013-06-28 09:02:24
你试试,1640培养基加上介素-2    1000单位每毫升,CD3   50ng/ml。养养看,不行就CD3加倍。

还有一个配方:IL-2、IL-1a、r-干扰素各1000u/ml     CD3 50ng/ml

希望对你有帮助。

谢谢这位前辈啊。这个配方你是用来养哪一种细胞的?有做过把淋巴结里的几种细胞放在一起养吗?
我现在用的是小鼠淋巴结。看文献上用的较多的,先订购了 con A和 PWM。
你有相关的文献么?
非常感谢!!
3楼2013-06-28 10:30:37
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elegant_00

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
百变小妮: 金币+5, 有帮助 2013-07-10 09:46:43
内容已删除
4楼2013-06-30 11:46:29
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百变小妮

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by elegant_00 at 2013-06-30 11:46:29
有条件的话试试加人血清的1640,加适当单位的il 2,会长的不错

谢谢。我先试着加了 con A和 PWM。感觉有增殖,但是不太快。准备加一下il-2试试。
5楼2013-07-10 09:48:48
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