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fayzhao

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[求助] 过期trizol可以用吗

大家好，
我最近提取线虫RNA，效果很差。测的OD值还可以，但是跑电泳结果很不好，能看到三条带，但是不清晰。
师姐说trizol已经有三年了，不知道有没有人用过过期的trizol呀？效果怎样呢？
求大家帮帮我，O(∩_∩)O谢谢啦！

这次提的RNA电泳图.jpg

去年提的RNA电泳图.jpg

[ Last edited by fayzhao on 2013-6-27 at 10:50 ]

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1楼 2013-06-27 10:47:29

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chuqiqi19

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小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2013-06-27 16:14:10
gyesang: 回帖置顶 2013-07-02 02:47:48

你要知道trizol提取RNA的原理是什么。TRIZOL的PH值对于提取RNA很重要的，过期的trizol的ph值变化厉害，所以已经不适合提取RNA了。trizol的主要成分是苯酚，苯酚能裂解细胞，也能使蛋白质变性，此外trizol中还有一些其它物质来抑制内外源RNA酶的活性，加入trizol后样品分为有机相和水相，核酸会在水相中，蛋白质会在有机相中只有在酸性ph下DNA和RNA才能有效的分层。
你提取的RNA有降解，更多的是基因组污染，所以更换trizol是必要的，当然，操作过程中也需要注意别有rna酶污染。
祝你好运