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fayzhao

金虫 (小有名气)

[求助] 过期trizol可以用吗

大家好,
我最近提取线虫RNA,效果很差。测的OD值还可以,但是跑电泳结果很不好,能看到三条带,但是不清晰。
师姐说trizol已经有三年了,不知道有没有人用过过期的trizol呀?效果怎样呢?
求大家帮帮我,O(∩_∩)O谢谢啦!
过期trizol可以用吗
这次提的RNA电泳图.jpg
过期trizol可以用吗-1
去年提的RNA电泳图.jpg



[ Last edited by fayzhao on 2013-6-27 at 10:50 ]
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chuqiqi19

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2013-06-27 16:14:10
gyesang: 回帖置顶 2013-07-02 02:47:48
你要知道trizol提取RNA的原理是什么。TRIZOL的PH值对于提取RNA很重要的,过期的trizol的ph值变化厉害,所以已经不适合提取RNA了。trizol的主要成分是苯酚,苯酚能裂解细胞,也能使蛋白质变性,此外trizol中还有一些其它物质来抑制内外源RNA酶的活性,加入trizol后样品分为有机相和水相,核酸会在水相中,蛋白质会在有机相中只有在酸性ph下DNA和RNA才能有效的分层。
你提取的RNA有降解,更多的是基因组污染,所以更换trizol是必要的,当然,操作过程中也需要注意别有rna酶污染。
祝你好运
5楼2013-06-27 15:20:30
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cnliu51

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fayzhao: 金币+2 2013-06-28 08:36:43
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-02 02:48:43
我不完全同意以上几位的看法。TRIZOL现在有很多厂家生产,各家的组分并不十分一致。 其中invitrogen公司的质量最好,价格也最贵,他家的TRIZOL是没有保质期的。4度下保存三年的这种TRIZOL我用过,没问题。
9楼2013-06-27 20:47:49
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普通回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fayzhao: 金币+1 2013-06-27 14:27:03
fayzhao(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-02 02:47:27
这就像吃过期食品或药物一样,不是过期了吃了就一定会出事,但是有点赌的味道......

为了实验,花了那么多钱不在乎一瓶trizol吧,也不贵~~
岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-06-27 12:59:07
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dcb005

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fayzhao: 金币+1 2013-06-27 14:27:19
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-02 02:47:39
很显然,你这次提的RNA 降解严重,拖带严重。换新的吧
★穷则独善其身,达则兼济天下★
3楼2013-06-27 14:15:00
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fayzhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dcb005 at 2013-06-27 14:15:00
很显然,你这次提的RNA 降解严重,拖带严重。换新的吧

那还会不会有其他原因呢?
4楼2013-06-27 14:27:51
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fayzhao

金虫 (小有名气)

1949stone: 不要冒险 2013-07-02 08:25:25
引用回帖:
5楼: Originally posted by chuqiqi19 at 2013-06-27 15:20:30
你要知道trizol提取RNA的原理是什么。TRIZOL的PH值对于提取RNA很重要的,过期的trizol的ph值变化厉害,所以已经不适合提取RNA了。trizol的主要成分是苯酚,苯酚能裂解细胞,也能使蛋白质变性,此外trizol中还有一些 ...

太感谢你啦,那我还是换瓶trizol试试吧,O(∩_∩)O谢谢!
6楼2013-06-27 15:24:02
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chuqiqi19

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fayzhao at 2013-06-27 15:24:02
太感谢你啦,那我还是换瓶trizol试试吧,O(∩_∩)O谢谢!...

楼主都不奖励一下啊
如果提取RNA遇到什么问题可以继续交流哈。
7楼2013-06-27 15:28:31
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zgb1982

木虫 (正式写手)

谁上传张自己提的RNA电泳图参考下
8楼2013-06-27 15:49:33
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biology-boy

禁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fayzhao: 金币+1 2013-06-28 08:37:44
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-07-02 02:48:51
本帖内容被屏蔽

10楼2013-06-27 23:13:16
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