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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 各位虫友洗涤DNA有什么技巧么?交流交流
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linkfuture

[交流] 各位虫友洗涤DNA有什么技巧么?交流交流

乙醇是直接倒掉,然后再用枪吸净  还是只用枪吸比较好 总感觉会把DNA倒掉了

还有干燥呢,自然干燥么,干燥程度有个参考么,(太干了,又不好溶解,不挥发干净又影响后面的反应)

我用电吹风干燥会有影响么

虽然都是细节,可是做好还真挺费劲的.

大家有高招支几个,学习学习
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1楼 2007-10-21 16:16:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

majieershao

铜虫 (初入文坛)
不是吧!我每次倒掉都用力把管口向下甩几下都不会掉下来,粘得很紧的.
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9楼2007-10-22 23:42:10
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普通回帖

wujiequn

捐助贵宾 (小有名气)
★
telomerase(金币+1,VIP+0):thanks!
个人感觉先把70%的乙醇轻轻倒掉，但不要把EP管倒置于吸水纸上，剩余的一点溶液用小枪吸掉比较好，这时候自然晾干也比较快。
电吹风干燥一般没什么影响，有时候吹得太干了可能会把DNA也吹跑了。
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2楼2007-10-21 20:43:44
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xuuue

★
telomerase(金币+1,VIP+0):讲得不错 虽与提问不是很相关哦
根据外观可以初步判断提取质量，好的DNA 沉淀为白色，干后透明；如果干后仍呈白色，常因蛋白较多；若呈黄至棕色，则是有多酚类杂质；呈胶冻状则含有多糖。
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3楼2007-10-21 21:05:57
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
★
asr(金币+1,VIP+0):thanks
乙醇是直接倒掉（绝大部分）,然后再离心然后用小枪吸净残留乙醇  
这样的话很快就干了 ，没吹过电风扇
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
4楼2007-10-21 21:15:41
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linkfuture

多谢几位的交流.....我那批EP管质量好差,倒完乙醇后,贴壁的好多...我就用吸水纸伸进去吸干,也不知道会污染DNA不

还有我总感觉沉淀贴壁不牢啊,一晃酒精,沉淀就松动了,很容易随酒精被倒掉的

正常的 DNA贴壁很紧么
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5楼2007-10-21 21:46:11
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wujiequn

捐助贵宾 (小有名气)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
引用回帖:
Originally posted by linkfuture at 2007-10-21 09:46 PM:
多谢几位的交流.....我那批EP管质量好差,倒完乙醇后,贴壁的好多...我就用吸水纸伸进去吸干,也不知道会污染DNA不

还有我总感觉沉淀贴壁不牢啊,一晃酒精,沉淀就松动了,很容易随酒精被倒掉的

正常的 DNA贴壁很 ...

不要用吸水纸，太脏了，会污染。直接用小枪头吸出剩余的乙醇。沉淀贴壁牢不牢无所谓，吸的时候注意不要把沉淀吸出来就是了。
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6楼2007-10-21 22:39:22
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linkfuture

johnsooh(金币+0,VIP+0):抽真空干燥怎么样?
引用回帖:
Originally posted by wujiequn at 2007-10-21 10:39 PM:

不要用吸水纸，太脏了，会污染。直接用小枪头吸出剩余的乙醇。沉淀贴壁牢不牢无所谓，吸的时候注意不要把沉淀吸出来就是了。

EP挂壁的乙醇太多了,要离心好几次才能用枪头吸干,一次有20个样的话,够忙活一阵子了,
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7楼2007-10-22 10:08:26
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linkfuture

谢谢斑竹的意见,不过我们这里没有抽真空装置之类的....
其实这一步还是很重要的,弄不好,可能会倒掉沉淀,影响最后的产量.或者有乙醇残留影响后续反应

特别是样品很稀缺时,提取一个样品不容易,在最后一步弄糟了,真是不甘愿..
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8楼2007-10-22 17:24:30
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glucidum

金虫 (正式写手)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):THX
一般情况下，用70%乙醇洗的时候DNA是会松动的，能松动是好事。去乙醇的方法像3楼说的那样就很好。至于吹干方面，一般基因组DNA不建议用吹风机吹干，一个是怕吹掉，另外一个原因是干燥过快会引起基因组DNA断裂。如果是质粒提取的话，那吹干是没问题的。如果超净台比较空闲的话，吸掉乙醇以后放超净台吹干其实也蛮快的。
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10楼2007-10-23 08:19:19
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