应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 标准曲线总是出问题...急死了..
191/2返回列表12下一页
查看: 3203  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qiqicharlotte

银虫 (初入文坛)

[求助] HPLC 标准曲线总是出问题...急死了..

现在刚开始做实验，但是做了1个月的标准曲线，陆续发现目前做的化合物对流动相缓冲溶液的pH特别敏感。同时quality control & standards 不能匹配，

我的实验过程是这样的，首先配两个样品20uM, 15uM ,然后20uM的作为standard 稀释多个，15uM 作为qc也稀释多个， 进样时依照浓度大小，依次进样。

结果每次的结果都是 qc部分偏小，在standards的标准曲线下面，不能匹配。

上周五做的一次更离奇，完全不匹配了...怎么回事啊？我觉得我使用移液枪完全没有问题。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

液相相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-25 00:13:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

huangq816

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从你的描述来看，是你配制的溶液线性不好，还是用精密移液管移液，误差可能会小点。
赞一下(1人) 回复此楼
人生就像一场马拉松，跑的最快的未必是笑到最后的！
4楼2013-06-25 10:59:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sjzhang156

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的QC不是和标准曲线一份，而且浓度是20和15，这两个配制过程出现误差是可能性很大的，再有进样要从小浓度逐渐增大，进完样之后要有足够的冲洗时间确保上一针的残留不会影响下一针。实在不行你交叉进样，一个标准一个QC，不排除因为仪器或者柱子的污染造成信号漂移。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-06-25 16:55:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sjzhang156

银虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sjzhang156 at 2013-06-25 16:55:49
你的QC不是和标准曲线一份，而且浓度是20和15，这两个配制过程出现误差是可能性很大的，再有进样要从小浓度逐渐增大，进完样之后要有足够的冲洗时间确保上一针的残留不会影响下一针。实在不行你交叉进样，一个标准一 ...

标准品和QC交叉进样可以最大限度较少仪器漂移的影响
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-06-25 16:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
注意你样品的浓度和粘度，生物产品的粘度较大，肯定有很大误差的。
赞一下(1人) 回复此楼
悲催的研发！
8楼2013-06-26 09:21:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hxl4054

铁杆木虫 (知名作家)

薛定谔的喵星人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
移液枪误差还是挺大的吧，个人愚见，没做过药分
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-25 00:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mikey_m

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
移液枪的误差如何是要看具体操作的
这个上面的问题挺多的
仔细找找原因吧
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-25 08:58:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swallow13

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
7楼2013-06-25 17:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiqicharlotte

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huangq816 at 2013-06-25 10:59:26
从你的描述来看，是你配制的溶液线性不好，还是用精密移液管移液，误差可能会小点。

其实我自己一开始担心移液枪的问题，然后我用分析天平测了几组移液枪取液的数据。 的确有偏差，但是不会很大，最大1%的差别
赞一下 回复此楼
9楼2013-06-27 03:33:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiqicharlotte

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sjzhang156 at 2013-06-25 16:55:49
你的QC不是和标准曲线一份，而且浓度是20和15，这两个配制过程出现误差是可能性很大的，再有进样要从小浓度逐渐增大，进完样之后要有足够的冲洗时间确保上一针的残留不会影响下一针。实在不行你交叉进样，一个标准一 ...

必须是两份啊，不然怎么一个标准，一个QC呢？
现在的确是交叉进样了。问题还是有，我感觉是化合物溶解的不好...
赞一下 回复此楼
10楼2013-06-27 03:34:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qiqicharlotte 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 10:43 by 1Nb0IVlmV6v0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 10:26 by 1Nb0IVlmV6v0
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-11 10:24 by 1Nb0IVlmV6v0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 7/350 2026-11-11 10:04 by 1Nb0IVlmV6v0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 3/150 2026-11-11 09:07 by 1Nb0IVlmV6v0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 07:06 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 04:32 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 04:07 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:54 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:13 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 5/250 2026-11-11 00:59 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +4 yexuqing 2026-11-04 6/300 2026-11-10 11:13 by susizheng
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭