24小时热门版块排行榜    

查看: 3670  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hxppxh

木虫 (正式写手)

[交流] 分析鱼肠道细菌的种类-采样和保存问题 已有3人参与

我大概要取2-300百条鱼的肠道细菌。
(1)器具的处理问题。我打算用一次性的刀柄和刀片解剖鱼,但是镊子和剪刀重复使用,每次使用后用75%的酒精处理可以吗?有没有更好的处理方法?

采样问题:
很多文献上说先把肠道内容物挤出来(取肠道细菌),然后用PBS或者盐水洗3次(取肠壁细菌)。
(2) 请问一般怎么洗肠壁?是把1条鱼的肠分3次放到放3管溶液?

样品保存问题
很多人说保存在-20或者-80度。
我采样在渔场采,那里有-20度冰箱。
(3) 在渔场采样需要一周多的时间,从那里到实验室需要一天时间,我打算用95%酒精保存,不知道是否可行?
(4) 肠壁细菌如何采样和保存呢?

DNA 提取。
我有几百条鱼,还没有最后决定用多少条鱼。提取方法打算用CTAB方法提取。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

开云者

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by hxppxh at 2013-06-27 10:26:29
采样后多长时间之内要放到-20度?
-20度放了几天后,像楼上说的,运输时放冰袋在箱子里,运输10多个小时,对后续结果和DNA提取有影响吗?...

这都是不是问题,粪便里菌很多,半天时间吧,到不影响,10小时 没事
挥霍不起青春
10楼2013-06-28 09:35:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

开云者

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+4, good! 2013-06-23 21:53:52
这个好弄,首先你不必担心污染,顶多放个酒精灯在旁边就行。你把肠子取出后,两端剪开,用两个镊子挤到2或者1.5mlEP管中就行,因为肠道中的菌很多,所以空气中细菌基本忽略了,再加上旁边有酒精灯,所以不必担心污染。提DNA是试剂盒首选德国QIAGEN的粪便试剂盒(忘记货号了),大约1500元,建议你把粪便弄到2ml管里(看说明书就知道为什么了),保存的-20没有任何问题。
挥霍不起青春
2楼2013-06-23 16:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hxppxh

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 开云者 at 2013-06-23 16:49:20
这个好弄,首先你不必担心污染,顶多放个酒精灯在旁边就行。你把肠子取出后,两端剪开,用两个镊子挤到2或者1.5mlEP管中就行,因为肠道中的菌很多,所以空气中细菌基本忽略了,再加上旁边有酒精灯,所以不必担心污染 ...

肠壁细菌怎么取呢?
肠道内容物可以保持在酒精里吗?
3楼2013-06-24 00:30:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

开云者

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by hxppxh at 2013-06-24 00:30:34
肠壁细菌怎么取呢?
肠道内容物可以保持在酒精里吗?...

肠壁细菌?这个我不太懂。内容物不放到酒精里,直接放到2ml的EP管中就行
挥霍不起青春
4楼2013-06-24 09:15:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 00:52 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 00:40 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 00:28 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 8/400 2026-08-22 23:51 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 10/500 2026-08-22 23:42 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见