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妞妞牛

铜虫 (正式写手)

[求助] 分子印迹吸附后紫外测的浓度比吸附前大

最近真的做不下去了  换了各种配比单体 和交联剂  溶剂  怎么测都是吸附后无论是印迹的还是非印迹的都比初始浓度大,求帮助  找不到原因干着急  希望  各位虫虫帮我想想办法 找找原因额
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坚持梦想
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mmj1024

银虫 (小有名气)

流星雨

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
妞妞牛: 金币+5, ★★★很有帮助, 感谢你的解答 2013-06-21 21:10:18
那很可能是因为你的印迹和非印迹都没洗脱完全有释放吧,如果我们做的话肯定会把洗脱液洗到定性上几乎是条平线,特别是在模板分子的最大吸收波长处一定要保证是零后才行,一般洗脱液是甲醇和醋酸,洗干净后还要用甲醇洗到中性才行的。其实这个和单体比例没什么区别的,另外交联剂的量不能太多,按照我们课题组经验,1:4:20的比例太大,交联剂在10就很大了,这个你看自己的实验再试试吧
永不言弃
2楼2013-06-21 16:17:28
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kof705991

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
妞妞牛: 金币+2, ★有帮助 2013-06-27 22:00:10
印迹聚合物分离是不是采用离心?是否确定上清液中没有悬浮的颗粒?我以前做过一次和你的结果一样,查出的原因就是没有彻底离心
一个意志坚定,敢作敢为的人,永远信任自己。
3楼2013-06-26 14:39:44
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tepid

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
妞妞牛: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-27 21:59:03
你先做空白,就是没有模板的溶液测试,然后看看是不是有吸光值,估计你的情况印记和非印迹都是有的。不过这个只能用来说明洗脱过程不完全,还需要继续洗,上面有人回答怎么洗了。还有紫外测试不太好,用HPLC最可靠。
得不到永远在骚动
4楼2013-06-26 21:25:26
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妞妞牛

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tepid at 2013-06-26 21:25:26
你先做空白,就是没有模板的溶液测试,然后看看是不是有吸光值,估计你的情况印记和非印迹都是有的。不过这个只能用来说明洗脱过程不完全,还需要继续洗,上面有人回答怎么洗了。还有紫外测试不太好,用HPLC最可靠。

我能不能用没有模版分子的甲醇溶液摇一下我的印迹和非印迹的硅胶  然后 用那个做为测紫外的空白给扣掉可不可以?
其实我用HPLC  C18 测了 有两个峰7分的和25分的,25分的比7分的面积大很多, 但是 只有7分的随浓度增大而变化,所以我就认为7分的是我的模版分子的峰,我测了我索式后的溶液在7分的时候没有峰,但是在25分都有峰。还有测紫外的时候220左右有一个很大的吸收峰,远比我定的287大很多,
你有没有想法呀   我没有思路了  望指教
坚持梦想
5楼2013-06-27 21:58:32
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妞妞牛

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kof705991 at 2013-06-26 14:39:44
印迹聚合物分离是不是采用离心?是否确定上清液中没有悬浮的颗粒?我以前做过一次和你的结果一样,查出的原因就是没有彻底离心

我有离心啊  3500转15分钟  够久的吧,还过有机膜呢 应该不是这个原因吧
坚持梦想
6楼2013-06-27 22:00:03
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tepid

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 妞妞牛 at 2013-06-27 21:58:32
我能不能用没有模版分子的甲醇溶液摇一下我的印迹和非印迹的硅胶  然后 用那个做为测紫外的空白给扣掉可不可以?
其实我用HPLC  C18 测了 有两个峰7分的和25分的,25分的比7分的面积大很多, 但是 只有7分的随浓度 ...

索氏后,模板没有峰可以说干净了,只计算模板的差值就行。就用HPLC测吧, 我以前都是这样的
得不到永远在骚动
7楼2013-06-27 22:39:05
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kof705991

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 妞妞牛 at 2013-06-27 22:00:03
我有离心啊  3500转15分钟  够久的吧,还过有机膜呢 应该不是这个原因吧...

那要看你的聚合分钟物颗粒大小了,我一般是采用10000转以上离心10分钟。你可以用个小测试来验证,用溶剂将你的印迹分子超声分散,然后再离心,再用上清液去做紫外吸收,检验下是否有吸收
一个意志坚定,敢作敢为的人,永远信任自己。
8楼2013-06-28 08:08:43
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妞妞牛

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by tepid at 2013-06-27 22:39:05
索氏后,模板没有峰可以说干净了,只计算模板的差值就行。就用HPLC测吧, 我以前都是这样的...

可是  我用HPLC测 用峰面积算  还是 吸附后比吸附前大。。。不晓得哪里出了问题。  还是谢谢你呀
坚持梦想
9楼2013-06-29 21:46:53
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妞妞牛

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by kof705991 at 2013-06-28 08:08:43
那要看你的聚合分钟物颗粒大小了,我一般是采用10000转以上离心10分钟。你可以用个小测试来验证,用溶剂将你的印迹分子超声分散,然后再离心,再用上清液去做紫外吸收,检验下是否有吸收...

谢谢你 的回复  我试一下额  
坚持梦想
10楼2013-06-29 21:47:21
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