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克隆基因,用PMD19-T载体转天根的感受态细胞,菌落少,测的序列全是空载体,求原因·
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syn1985
木虫
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虫号: 463029
注册: 2007-11-19
性别:
MM
专业: 病原细菌与放线菌生物学
3-4K片段就要找比他更大的载体 换个载体吧 找找看有没有那个生物公司的载体可以到4K的
你这么长的片段做TA克隆着实不是很容易 你后面的目的是啥 一定非要经过TA克隆这一步吗 不可以跳过吗 如果你后面需要构建载体 你可以直接酶切连载体好了 再用载体去测序 何必经过这么麻烦的一步
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21楼
2014-10-06 11:20:40
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铁虫
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虫号: 7658426
注册: 2017-12-21
专业: 动物遗传学
引用回帖:
10楼
:
Originally posted by
hellohuo
at 2013-06-21 09:33:15
做过菌落PCR,看到有条带,然后送去测序,结果都是空载体。估计是因为载体自连之后的片段大小和我的目的基因的大小差不多吧···所以我在纠结究竟是哪里出了问题~...
我想问一下,用这个载体链接,DNA 加的量怎默算
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22楼
2018-11-13 13:36:24
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