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宸琦qq

新虫 (初入文坛)

[求助] 已知蛋白质38KD,如何获得其全长基因序列?

血栓栓塞性疾病严重影响人类的健康和寿命。由血栓引起的常见疾病主要有急性心肌梗塞、脑血栓和静脉血栓塞等。目前,临床上治疗血栓栓塞性疾病的首选方法是溶栓疗法,此法具有死亡率低、费用少等优点,更适合我国国情。因此近年来人们一直热衷于研究开发新的经济、适用、有效、无毒副作用的溶栓药物。我们最近从豆豉中筛选到一株能分泌高效水解血纤维蛋白(血栓的主要成分)的酶的芽孢杆菌菌株,经SDS-PAGE鉴定,该溶栓酶的分子量约38 kD 。但至今还没有见到该菌产溶栓酶的报道,也没有该酶基因的任何资料,请详细设计一株能高产分泌型溶栓酶的基因工程菌的构建路线,内容包括目的基因的克隆、重组、表达。
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许许小静

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-17 05:27:56
把那个38kDa的蛋白从胶上挖出来送质谱测序, 这样你会得到一部分氨基酸序列的信息. 然后参考一楼的答复, 根据这些蛋白片段序列设计引物做5' 和 3' RACE.

挖出来的这一条 要是 不能 保证 是纯的一个蛋白  做质谱 能得到 氨基酸信息吗?
4楼2013-06-18 10:30:59
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