应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 只知道基因CDS区序列，如何扩增该基因的启动子
52/1返回列表
查看: 5987  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

waterworld

木虫 (正式写手)

[求助] 只知道基因CDS区序列，如何扩增该基因的启动子

如题，我想克隆山羊一个基因的启动子，CDS区已经由本实验室另外的师妹克隆出来，本来想克隆5‘RACE之后找到转录起始位点，再克隆启动子的，但是最近发现5'RACE试剂盒用完啦，那个试剂盒比较贵，再买一个的可能性不是很大。所以目前在这种情况下如何克隆该基因的启动子。
还有，山羊和牛的相似性很高，可以参考牛的基因组序列，查到NCBI中有牛的mRNA序列，但是只有部分5’RACE序列，不到100bp的样子。。。因为目前山羊的基因组还没有公布，我们克隆山羊的启动子一般都是根据牛的基因组序列设计，不知道在有这些信息的情况下怎么设计引物克隆？？？？求各位大神指教！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
Never grow old
1楼 2013-06-16 21:34:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coco1230

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by waterworld at 2013-06-16 21:34:20
如题，我想克隆山羊一个基因的启动子，CDS区已经由本实验室另外的师妹克隆出来，本来想克隆5‘RACE之后找到转录起始位点，再克隆启动子的，但是最近发现5'RACE试剂盒用完啦，那个试剂盒比较贵，再买一个的可能性不是 ...

请问你最后扩增出来了它的启动子了吗？我现在也只有一段CDS序列，想要得到它的启动子序列，你有什么好的方法吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
12楼2017-09-30 15:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
waterworld: 金币+3 2013-06-17 09:58:49
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-06-17 13:57:50
第一、可以在比对后在保守区设计引物来扩增
第二、步移
希望可以帮到你，试验顺利~~
赞一下 回复此楼
总有一天我要修改用户名。
2楼2013-06-16 22:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongyz

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
waterworld: 金币+3 2013-06-17 09:58:41
myprayer: Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-17 13:58:09
这篇文献应该可以解决你的问题： 长距离反向PCR技术高效扩增已知DNA片断的侧翼序列
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-17 00:16:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
waterworld: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-06-17 09:58:30
myprayer: Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-17 13:58:15
5’-RACE，基因组文库筛选出完整基因，反向PCR，染色体步移等。具体文献和Procotols，查分子克隆。

Molecular cloning--Laboratory manuals(2001)3rd edition（3 Volumes) Free
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5998393
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-17 01:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿天大材料与化工（085600）总分338 +4 蔡大美女 2026-03-13 4/200 2026-03-18 22:47 by walc
[考研] 321求调剂 +3 何润采123 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:27 by li123456789.
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +4 1孙悟空 2026-03-17 4/200 2026-03-18 17:59 by fivewind
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 9/450 2026-03-18 15:31 by vgtyfty
[考研] 302求调剂 +10 呼呼呼。。。。 2026-03-17 10/500 2026-03-18 12:45 by Linda Hu
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 材料与化工求调剂 +6 为学666 2026-03-16 6/300 2026-03-17 20:15 by peike
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 085600材料与化工求调剂 +5 绪幸与子 2026-03-17 5/250 2026-03-17 16:40 by laoshidan
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭