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waterworld木虫 (正式写手)
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[求助]
只知道基因CDS区序列，如何扩增该基因的启动子
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如题，我想克隆山羊一个基因的启动子，CDS区已经由本实验室另外的师妹克隆出来，本来想克隆5‘RACE之后找到转录起始位点，再克隆启动子的，但是最近发现5'RACE试剂盒用完啦，那个试剂盒比较贵，再买一个的可能性不是很大。所以目前在这种情况下如何克隆该基因的启动子。 还有，山羊和牛的相似性很高，可以参考牛的基因组序列，查到NCBI中有牛的mRNA序列，但是只有部分5’RACE序列，不到100bp的样子。。。因为目前山羊的基因组还没有公布，我们克隆山羊的启动子一般都是根据牛的基因组序列设计，不知道在有这些信息的情况下怎么设计引物克隆？？？？求各位大神指教！！！ |
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【答案】应助回帖
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waterworld: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-06-17 09:58:30
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5’-RACE，基因组文库筛选出完整基因，反向PCR，染色体步移等。具体文献和Procotols，查分子克隆。 Molecular cloning--Laboratory manuals(2001)3rd edition（3 Volumes) Free http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5998393 |
4楼2013-06-17 01:27:49