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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 工程菌复壮问题
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骑着狼放羊

金虫 (著名写手)

余香肉丝

[求助] 工程菌复壮问题

各位做工程菌的前辈、大侠们，有没有做过质粒工程菌复壮的呢？效果如何？好像现在质粒工程菌都退化后都是重新转化，不过现在没有条件。急求，回答得好的追加金币

[ 来自小组 生物医药家族 ]
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1楼 2013-06-15 22:58:35
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Xsonglin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
骑着狼放羊: 金币+8 2013-06-21 11:41:38
用筛选标记筛选的作用不大，衰退并不全是质粒丢失，不见得就失去标记。我做过这工作，抗性培养基里长的很好，但发酵性能很低。我觉得复壮的唯一方法就是分单菌落上发酵罐验证。工作量太大。
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7楼2013-06-21 11:34:20
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助交流！ 2013-06-16 11:34:29
骑着狼放羊: 金币+4 2013-06-21 10:18:38
骑着狼放羊: 金币+2 2013-06-21 10:20:45
质粒上一般会有筛选标记，比如抗性，营养缺陷；如果有条件，针对质粒上的筛选标记在选择压力下重新筛选。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-06-16 07:48:04
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wyz5527

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助交流！ 2013-06-16 11:34:17
骑着狼放羊: 金币+6 2013-06-21 10:19:28
1、如果只有做斜面、平板的条件，可以在复壮时挑选那些长得慢的菌再纯培养一次。一般质粒丢失的菌长的普遍较快
2、或者如上楼所说增大压力如加抗生素等等（针对质粒对应的因素）抑制质粒丢失菌的生长。
3、改善培养环境参数（温度、ph等等）改变菌的生长速率，使带质粒的菌增多，一般带质粒的菌对外界环境反应要慢，这样可以变相的提高质粒菌数，形成优势。
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简练才是真正的丰富
3楼2013-06-16 10:21:15
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骑着狼放羊

金虫 (著名写手)

余香肉丝
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaodahe at 2013-06-16 07:48:04
质粒上一般会有筛选标记，比如抗性，营养缺陷；如果有条件，针对质粒上的筛选标记在选择压力下重新筛选。

你是否做过呢？效果如何？
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你是最棒的，只要相信自己，没有做不到！！！
4楼2013-06-21 10:18:18
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