| 查看: 9487 | 回复: 44 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
lmcyjxs金虫 (正式写手)
|
[求助]
大牛来指点下啊~CDS区到底含不含内含子？看了相关的帖反而把我搞糊涂了
|
||
|
各位大侠，我要崩溃了，不是说我没之前没看过帖，而是看了帖之后把我搞混了。 1 CDS区到时含不含内含子？有一个老师说不含，一个说含，我看了论坛，两种说法我都好像看过。我认为是不含的。 2 如果CDS区不含内含子，有些基因在NCBI里查到的，标题上注明是全长CDS区，但下面的注释里却显示含有很多个CDS区，基因序列也显示含有多个CDS区，如图1，难道CDS区真含有内含子才是正解？但为什么我克隆了一个基因，反转录得到的，不含内含子了，获得的基因就跟图1情况一样，终止密码子还更多，导致多个CDS区存在，怎么会这样呢？如图2 3 若在一个基因序列里，含有多个CDS区（就是在多个不同位置含终止密码子），连接到表达载体是不是指翻译其识别的第一个CDS？  1.jpg  2.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有163人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
lmcyjxs
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1088.2
- 散金: 119
- 红花: 7
- 帖子: 954
- 在线: 124.3小时
- 虫号: 1255578
- 注册: 2011-04-05
- 性别: MM
- 专业: 中药资源
|
您好！谢谢您的耐心和热心帮助！我对第一个解决路线不是很理解，是反转录后，用特异性上游引物和Oligo（dT）引物来做PCR扩增，然后，将此RT-PCR产物克隆至克隆载体，测序初步表明是目的产物后再同时用特异性上游引物和下游引物，以T-载体和目的基因的重组质粒为模版扩增吗？以Oligo(dT)来做下游引物扩增的主要原理是怎样的啊？ 因为反转录的时候，已经有同时用到Oligo（dT）和Ramdom 6 mers引物了，理论上Oligo（dT）引物可以将mRNA调取出来，即反转录液里就算有DNA的污染，应该也会有cDNA存在而扩到不含内含子的CDS的，可是我的PCR产物里，只有含内含子的目的基因，在相应的位置上，不含内含子的CDS产物连个影都没有，我不是很理解。  |
27楼2013-06-23 10:57:38
laoshi0633
木虫 (职业作家)
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 2880.6
- 红花: 2
- 帖子: 3541
- 在线: 633.9小时
- 虫号: 424291
- 注册: 2007-07-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
2楼2013-06-14 16:27:25
laoshi0633
木虫 (职业作家)
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 2880.6
- 红花: 2
- 帖子: 3541
- 在线: 633.9小时
- 虫号: 424291
- 注册: 2007-07-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
3楼2013-06-14 16:31:36
lmcyjxs
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1088.2
- 散金: 119
- 红花: 7
- 帖子: 954
- 在线: 124.3小时
- 虫号: 1255578
- 注册: 2011-04-05
- 性别: MM
- 专业: 中药资源
4楼2013-06-14 17:07:52
40