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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家有没有做过SacI和XhoI双酶切的？
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lushuiw

银虫 (正式写手)

[求助] 大家有没有做过SacI和XhoI双酶切的？

SacI和XhoI，Takara的酶，这两个酶双酶切用1*M的Buffer双酶切，效率不高，效果不好，大家有没有用这两个酶做过的，还要注意什么事项吗？要是分步的话要怎么做呀？
多谢大家了！
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1楼 2013-06-14 10:29:45
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lushuiw: 金币+5 2013-06-14 17:36:50
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物版块 期待你的精彩和更详细的解答。 2013-06-29 20:20:04
分步的时候，切完一个要把上一个酶个灭活，然后切胶回收（此步也可以省略），再进行下一个酶切。
用Fermentas的快切酶，用他们提供的共有的（也是唯一的）buffer （green buffer），效果很好的。
试验顺利，希望可以帮到你~~
赞一下 回复此楼
总有一天我要修改用户名。
3楼2013-06-14 17:33:47
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ghost202

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-05 14:32:48
我们用的是Fermentas的快速酶，这两个酶很好切的
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-14 15:52:04
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lushuiw

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 137167741 at 2013-06-14 17:33:47
分步的时候，切完一个要把上一个酶个灭活，然后切胶回收（此步也可以省略），再进行下一个酶切。
用Fermentas的快切酶，用他们提供的共有的（也是唯一的）buffer （green buffer），效果很好的。
试验顺利，希望可 ...

谢啦，我试试
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4楼2013-06-14 17:37:01
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