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yhdchina

新虫 (初入文坛)

[交流] 怎样能得到高纯度的蛋白? 已有4人参与

我用Ni离子亲和层析纯化融合蛋白,6个His标签在载体端,然后柱上用肠激酶4°C过夜将载体与目的多肽切开,纯化得到我的目的多肽(约4.2KDa),此多肽是存在于肠激酶缓冲液中的。在中科新生命用RP-HPLC测纯度只有50%,不知道怎么回事,怎样能得到纯度>95%的蛋白呢?
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fuding6

木虫 (小有名气)


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要做到95%以上很容易,用C18反相住纯化便可得到。
3楼2013-06-09 22:50:01
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fuding6

木虫 (小有名气)


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引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-10 01:36:02
要是真么简单就能分离分离蛋白质的话,你就该获得诺贝尔科学奖!...

那是因为你没做过多肽的纯化,多肽的纯化都是用反相制备的,吉尔生化就做这个。
6楼2013-06-10 10:30:50
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