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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 现在国际上流行哪种多糖测定方法
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cynthia8225

新虫 (小有名气)

[交流] 现在国际上流行哪种多糖测定方法

如题，现在想检测胞外多糖的含量，但是在查找文献时发现有醇沉后用苯酚硫酸法测定的，也有直接测定EPS干重的，还有其他一些方法，可是到底哪种方法比较好呢？
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1楼 2013-06-06 09:26:36
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蓝龙教主

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by cynthia8225 at 2013-06-07 21:45:43
正解。。。。确实如此呢。。。再请教个问题，为什么有的多糖是用水溶测定，有的是用氢氧化钠呢？有什么说法不？我是做的灵芝多糖，所以看到很多子实体多糖测定的时候是水提，但是到菌丝阶段就变成氢氧化钠了。。。 ...

多糖分为酸性多糖与中性多糖，主要是里面可能含有糖醛酸类所致。
采用氢氧化钠提就是最大限度提取，但是酸碱性太强会导致多糖结构改变，我前面做分离的时候，用碱提，然后加乙酸沉淀酸性糖再分离。
这样其实也有问题，有研究表明，酸性糖活性较好，但是我做结构的时候分离出去了酸性糖，做的比较粗。
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cynthia8225
15楼2013-06-08 16:50:00
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蓝龙教主

金虫 (正式写手)
★ ★
cynthia8225(金币+1): 谢谢参与
PSA: 金币+1, 谢谢 2013-06-06 15:41:36
好像没有专门的，个人感觉苯酚硫酸就行，但是要换算，直接测定不可能~~
仔细想想问什么
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3楼2013-06-06 11:19:59
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cynthia8225

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝龙教主 at 2013-06-06 11:19:59
好像没有专门的，个人感觉苯酚硫酸就行，但是要换算，直接测定不可能~~
仔细想想问什么

就是在沉淀胞外多糖的时候，有人要除蛋白以后再进行测定，可是由于样品较多，每个都透析感觉不实际。。。所以不知道怎么办了。。。还有为什么直接测定不可能呢？
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4楼2013-06-06 15:36:29
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蓝龙教主

金虫 (正式写手)
★ ★
豆哥: 金币+2, 谢谢参与 2013-06-08 08:22:45
引用回帖:
4楼: Originally posted by cynthia8225 at 2013-06-06 15:36:29
就是在沉淀胞外多糖的时候，有人要除蛋白以后再进行测定，可是由于样品较多，每个都透析感觉不实际。。。所以不知道怎么办了。。。还有为什么直接测定不可能呢？...

我个人认为，多糖本身就是个混合物，只能说大概是什么样的~~要精确测量，必须做到：1.采用标准品为该组分多糖，分子量已知，链接方式已知，由多少单糖组成已知，这样才可以；2.苯酚硫酸法是采用了葡萄糖或者其他单糖测定的，但是多糖本身的复杂性，包括多糖在酸性条件下水解后，也同样有吸收，当你的样品是混合物时候，你如何确定多糖的含量？
透析也是个粗分的办法，因为目前也没有特别好的方法；要不然还装柱子呗~~这个东西，反正国内做的好的没几个，不是我们不努力，而是有些问题，确实存在，就不好解决。
我再提一个问题，多糖的纯度如何测定？
你想清楚这个问题的话，就明白为什么多糖含量没办法测定了
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5楼2013-06-06 16:12:02
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