24小时热门版块排行榜    

查看: 2338  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liujun1102

金虫 (正式写手)

[求助] 关于做染色质免疫共沉淀的几个问题,请高手赐教

小弟现在想做染色质免疫共沉淀,有几个问题。第一,用的枪头及EP管等等需要高压灭菌吗?第二,TE缓冲液能用双蒸水代替吗?如果能代替那么双蒸水需要灭菌吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujun1102

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-08 18:27:09
需要, 因为不管怎么洗脱, 非特异的结合总是会发生的.

那加内参还用做input吗?还是input也得加内参?
7楼2013-06-09 10:45:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liujun1102: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-06-09 10:44:25
灭菌是生物实验最基本的要求, 灭菌的同时也把可能污染的蛋白, DNA破坏掉. 公司卖的都说他们已经灭过菌了. 理论上你不用再做一次, 当然如果你实验式里用的这些东西来自信誉可靠的公司.
第二个你是不是指最后得到的DNA? 因为貌似之后最后纯化DNA时用到TE. 这个不能用双蒸水, 因为对长期保存DNA不利, 如果你担心TE里面的EDTA会影响PCR, 你可以用10mM Tris(pH 8.0) 代替.
2楼2013-06-05 17:29:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujun1102

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-05 17:29:55
灭菌是生物实验最基本的要求, 灭菌的同时也把可能污染的蛋白, DNA破坏掉. 公司卖的都说他们已经灭过菌了. 理论上你不用再做一次, 当然如果你实验式里用的这些东西来自信誉可靠的公司.
第二个你是不是指最后得到的D ...

用TE不是最后保存DNA用,是IP之后解交联之前,洗抗体什么的用。最后DNA保存在elution buffer中
3楼2013-06-06 08:57:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

明白, 我不用TE的, 洗完LiCl就是elution buffer了. 但是能不能用纯水代替我说不准.
4楼2013-06-06 15:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见